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文檔簡介
1、目的:比較犬兩種不同來源的間充質干細胞,牙槽骨來源干細胞(alveolar bone-derived stem cells, ABSC)和骨髓間充質干細胞( bone marrow mesenchymal stromal cells,BMSC)的體外成骨能力,為研究者使用組織工程修復頜面部骨缺損在種子細胞的選擇上提供更多的理論支持。
方法:取同一只犬的牙槽骨骨組織和髂骨骨髓作為ABSC和 BMSC的來源。第3代細胞進行如下的檢
2、測:MTT法評估 ABSC和 BMSC的增殖能力;分別在成骨誘導液和普通培養(yǎng)液的培養(yǎng)條件下,在不同的時間點使用堿性磷酸酶染色和茜素紅染色,觀察細胞的堿性磷酸酶分泌和鈣鹽沉積能力,同時使用 PNPP偶氮法法對胞內的堿性磷酸酶活力進行測定;成骨誘導后7 d,14 d,21 d利用RT-PCR檢測關鍵性成骨因子(COL-1,BMP-2,ALP, Runx2及OCN)的表達情況。
結果:相較 BMSC,ABSC增殖能力略高,堿性磷酸酶
3、和鈣結節(jié)的表達能力更強。COL-1早期在 ABSC中的表達高于 BMSC,并隨著時間呈下降趨勢。BMP-2早期在ABSC中的表達更高,晚期在BMSC中的表達更高,在兩組細胞中均呈上升趨勢。ALP在ABSC中的表達始終高于BMSC,且在14 d達到最高峰。Runx2在 ABSC中的表達在14 d達到最高峰,而 BMSC中 Runx2的表達隨時間呈上升趨勢,并在21 d高于ABSC。OCN總體呈上升趨勢,14 d和21 d有明顯表達,且AB
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