金山五味子果實化學成分和生物活性暨2-甲氧基胡桃醌誘導HepG2細胞凋亡機制.pdf

1、本論文共分為三個部分。
　　第一章對神農(nóng)架產(chǎn)五味子屬植物金山五味子(Schisandra glaucescens Diels)果實的化學成分及其生物學活性進行了研究。第二章對從野核桃根皮中分離獲得的抗腫瘤活性成分2-甲氧基胡桃醌誘導人肝癌細胞HepG2凋亡的機制進行了研究。論文第三部分對2001-2012年間獲頒Arthur E. Schwarting獎和Jack L. Beal獎的25篇J. Nat. Prod.期刊文章及相關背

2、景進行了綜述。
　　一、金山五味子果實化學成分及生物活性研究
　　金山五味子(Schisandra glaucescens Diels)是一種五味子科五味子屬的藤本植物，主要分布于湖北省西部和四川省東南部地區(qū)。本實驗室前期對該植物藤莖的化學成分進行了系統(tǒng)研究，從中發(fā)現(xiàn)了一系列結構新穎、生物活性顯著的化合物，但目前尚無關于金山五味子果實化學成分及生物活性的研究報道。
　　為開發(fā)利用金山五味子果實資源，對其化學成分和生物學

3、活性進行了系統(tǒng)研究，從中共分離得到36個化合物，包括10個新化合物?；衔镱愋秃w木脂素、三萜、倍半萜、有機酸和脂肪醇。通過理化常數(shù)測定及UV、IR、HRESIMS、ECD、1H NMR、13C NMR、DEPT、HSQC、HMBC、1H-1H COSY、NOESY等波譜數(shù)據(jù)分析，并結合ECD計算、水解反應、氣相分析、標準品對照等方法，最終確定了上述36個化合物的化學結構。在所得到的的化合物中，化合物1、2、3、4a、4b為新的木脂素類

4、成分，而化合物15、16、17、18、19為新的三萜類成分。
　　本實驗還分別對分離獲得的木脂素類成分（化合物1-14）和三萜類成分（化合物15-31）的生物活性進行了研究。對于木脂素類成分，我們測試了其抗氧化活性及神經(jīng)保護作用，結果顯示化合物4、7、8、10、11和12在DPPH氧化自由基清除實驗及FRAP總抗氧化活性測試中表現(xiàn)出不同程度的抗氧化作用，而化合物1、2、6、7、8、11和12則表現(xiàn)出對Aβ25-35引起的人神經(jīng)母瘤

5、細胞SHSY5Y損傷的保護作用。此外，我們還測試了三萜類成分對小鼠黑色素瘤細胞 B16的細胞毒性作用，結果顯示化合物22、25、28和29對B16細胞表現(xiàn)出較強的細胞毒性（其中化合物22和28的IC50值均小于10μM），且上述4種三萜類化合物的細胞毒活性為首次報道。
　　二、2-甲氧基胡桃醌誘導HepG2細胞凋亡機制研究
　　2-甲氧基胡桃醌是從野核桃(Juglans cathayensis Dode)根皮中分離獲得的一種

6、含量較大的萘醌類化合物。本實驗室前期工作顯示，該化合物在體外及體內(nèi)實驗中對肝癌細胞的生長表現(xiàn)出很強的抑制作用，具有良好的抗腫瘤藥理活性，但目前尚無關于該化合物抗腫瘤作用機制的研究報道。
　　為弄清2-甲氧基胡桃醌對HepG2細胞的作用機制，利用流式細胞儀結合PI染色的方法分析了2-甲氧基胡桃醌對HepG2細胞細胞周期的影響，利用流式細胞儀結合AnnexinV-FITC/PI染色的方法測試了2-甲氧基胡桃醌誘導HepG2細胞的凋亡率