北五味子揮發(fā)油生物活性的研究及其誘導(dǎo)肝癌HepG2細胞凋亡機制的初步探討.pdf

1、五味子為木蘭科(Magnoliaceae)植物五味子干燥成熟果實,因其果肉酸甜,種子苦辣,略有咸味,故名為五昧子,它有北五味子和南五味子之分,通常所說的五味子只特指北五味子。五味子是著名的滋補性中藥,具有斂肺滋腎、生津斂汗、寧神安神的功效,現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明,五味子對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等均有調(diào)節(jié)作用,同時還發(fā)現(xiàn)其具有抗腫瘤、抗氧化、抗衰老、保護肝臟等作用。
　　 北五味子的主要有效成分包括木脂素、多糖和揮發(fā)油等,

2、目前對木脂素的研究較多而深入,有關(guān)揮發(fā)油的研究較多集中于提取與成分分析鑒定,而揮發(fā)油的生物活性研究與其對肝癌HepG2細胞凋亡機制方面的探討仍未見報道,這也是本研究的目的所在。
　　 1北五味子揮發(fā)油的制備與化學(xué)成分分析鑒定采用同時蒸餾-萃取法從北五味子中提取揮發(fā)油,并通過GC-MS技術(shù)分析鑒定其化學(xué)組成成分。GC-MS分析共分離出33個峰,鑒定出20種化合物,結(jié)果顯示揮發(fā)油的主要成分為烯類,主要包括依蘭烯(含量為19.83％)

3、、2,6-二甲基-雙環(huán)[3.1.1]庚-2-烯(含量為7.18％)、1H-benzocyclohtene,2,4a,5,6,7,8-hexahyydro-3,5,5,9-tatramthyl-,r)-(含量為5.71％)和花柏烯(含量為5.24％)。
　　 2北五味子揮發(fā)油生物活性的研究用DPPH法和ABTS法測定了北五味子揮發(fā)油的抗氧化能力,結(jié)果表明在一定濃度范圍內(nèi)北五味子揮發(fā)油抗氧化能力與其濃度呈劑量依賴關(guān)系,且其對DPPH

4、和ABTS·+自由基的有效清除濃度(EC50)分別為1.49±0.08和0.57±0.09μ L／mL。
　　 用濾紙片法測定了北五味子揮發(fā)油對大腸桿菌、枯草桿菌和金黃色葡萄球菌抑制作用,結(jié)果顯示,北五味子揮發(fā)油對三種菌均有抑制效果,且當揮發(fā)油稀釋為6.25％時對三種菌的抑制效果最明顯,抑菌圈直徑分別為17.67±0.56、16.67±0.31和8.33±0.11mm,但對大腸桿菌和枯草桿菌的抑菌效果明顯大于金黃色葡萄球菌。

5、r>　　 用MTT法檢測了北五味子揮發(fā)油的抗腫瘤作用,結(jié)果顯示,北五味子揮發(fā)油對HepG2、HeLa、B16和SY5Y四種實驗?zāi)[瘤細胞增殖均有抑制作用,且其半數(shù)抑制率濃度(IC50)分別為0.16±0.03、0.20±0.05、0.13±0.08和0.29±0.08,表明不同的腫瘤細胞對北五味子揮發(fā)油的敏感性不同。
　　 3北五味子揮發(fā)油誘導(dǎo)肝癌HepG2細胞凋亡用T—SOD試劑盒測定了肝癌HepG2細胞內(nèi)T—SOD活性,流式