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文檔簡介
1、味覺是哺乳動(dòng)物極為重要的感覺,其中苦味是五大基本味覺之一??辔镔|(zhì)受體近期被廣泛發(fā)現(xiàn)于身體的各個(gè)組織細(xì)胞中,如:胃腸道細(xì)胞,睪丸細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞和呼吸細(xì)胞。近期的研究表明苦物質(zhì)受體參與了氣管平滑肌細(xì)胞的舒張作用,其過程是在給氣管平滑肌細(xì)胞激動(dòng)劑如乙酰膽堿,引起氣管收縮之后,再加入苦物質(zhì)如chloroquine,能夠使氣管平滑肌細(xì)胞舒張。但是在氣管平滑肌細(xì)胞靜息狀態(tài)下,單純加入苦物質(zhì)卻引起了氣管平滑肌細(xì)胞的鈣離子的升高。這看似矛盾的作用使得苦
2、物質(zhì)作用于氣管平滑肌細(xì)胞的機(jī)理急待闡明。
本文一方面研究的是通過測(cè)量氣管肌張力的方法,給完預(yù)刺激之后,在給激動(dòng)劑乙酰膽堿的時(shí)候再給苦物質(zhì)chloroquine能引起氣管的舒張;并且用激光共聚焦雙記錄的方式,我們把鈣離子用特異性的染料FLUO-4染色,通過透射光和激光的雙記錄,我們看到細(xì)胞收縮的同時(shí),chloroquine能降低細(xì)胞的鈣離子,我們認(rèn)為這是引起氣管舒張的主要原因。
另一方面研究的是苦物質(zhì)chloroqui
3、ne在靜息狀態(tài)下能否引起氣管平滑肌細(xì)胞的收縮,并闡明其機(jī)理。通過氣管環(huán)肌張力測(cè)量的方法,在給完3次乙酰膽堿預(yù)刺激之后,靜置30分鐘使氣管恢復(fù),觀察氣管在靜息狀態(tài)下加入chloroquine時(shí),能引起氣管平滑肌的一過性的收縮,為了證明引起收縮作用的鈣離子是來源于細(xì)胞外的鈣離子進(jìn)入,還是細(xì)胞鈣庫中的鈣離子釋放入胞漿,我們先用無鈣離子的細(xì)胞外液進(jìn)行相同的實(shí)驗(yàn),chloroquine依然能引起收縮。為了進(jìn)一步驗(yàn)證,我們用鈣泵阻斷劑CPA使細(xì)胞內(nèi)
4、鈣排空后再加入chloroquine,則收縮作用被阻斷。這兩方面同時(shí)印證了chloroquine引起氣管平滑肌收縮的機(jī)理是使細(xì)胞內(nèi)鈣釋放進(jìn)入胞漿,胞漿鈣離子濃度升高引起了收縮。
苦物質(zhì)引起的收縮是一過性的,其模式很像內(nèi)鈣釋放所引起的,我們就觀察chloroquine對(duì)IP3受體的影響,用IP3受體阻斷劑2-APB阻斷后,加chloroquine后氣管平滑肌無收縮,則chloroquine作用于IP3受體使內(nèi)鈣釋放的,其上游通路
5、GProtein-PLC可能發(fā)揮了作用,通過特異性的Gα阻斷劑PTX培養(yǎng)氣管環(huán)過夜,再加入chloroquine時(shí),其收縮作用被抑制,同樣的實(shí)驗(yàn)用Gβγ阻斷劑Gallein則對(duì)收縮沒有抑制作用。這些數(shù)據(jù)說明了chloroquine通過Gα-PLC-IP3-IP3R通路引起細(xì)胞內(nèi)鈣的釋放,導(dǎo)致了這個(gè)一過性的收縮。
我們研究發(fā)現(xiàn),苦物質(zhì)通過苦受體,引起了鼠氣管平滑肌收縮,并非舒張,本研究結(jié)果對(duì)進(jìn)一步探討苦物質(zhì)和苦受體在哮喘氣道高反
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