蛋白質(zhì)棕櫚?；揎椗czDHHC16在DNA損傷應(yīng)激中的作用.pdf

1、蛋白質(zhì)棕櫚酰化修飾是蛋白質(zhì)翻譯后脂質(zhì)化修飾調(diào)控的重要形式之一，已有越來越多的研究揭示出蛋白質(zhì)棕櫚酰化修飾及棕櫚?；D(zhuǎn)移酶在癌癥及神經(jīng)退行性疾病中扮演了重要的角色，然而對(duì)于棕櫚?；揎椚绾螀⑴c到癌癥及神經(jīng)退行性疾病中的機(jī)制并不清楚。癌癥的形成主要與基因突變累積有關(guān)，特別是抑癌基因功能的喪失以及癌基因的突變。細(xì)胞中存在著監(jiān)控防御系統(tǒng)，當(dāng)細(xì)胞受到壓力損傷而引起DNA突變時(shí)，將啟動(dòng)DNA損傷應(yīng)激系統(tǒng)來監(jiān)控和修復(fù)損傷的DNA，以保證基因組的完整性

2、而避免因DNA錯(cuò)誤累積而導(dǎo)致的癌癥發(fā)生。迄今為止，還不清楚蛋白質(zhì)棕櫚酰化修飾是否參與DNA損傷應(yīng)激，而了解棕櫚?；揎椩贒NA損傷應(yīng)激中的作用對(duì)于了解其與癌癥及神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生具有非常重要的意義。
　　本研究的目的是了解棕櫚?；揎椩贒NA損傷應(yīng)激中的作用。我們用棕櫚?；揎椧种苿?-溴十六酸作用于小鼠胚胎成纖維細(xì)胞，阿霉素對(duì)細(xì)胞進(jìn)行DNA損傷誘導(dǎo)，進(jìn)而檢測(cè)2-溴十六酸對(duì)DNA損傷應(yīng)激的影響，同時(shí)為了進(jìn)一步研究棕櫚?；D(zhuǎn)移酶在

3、 DNA損傷應(yīng)激中的作用，我們?cè)谧貦磅；D(zhuǎn)移酶zDHHC16敲除的胚胎成纖維細(xì)胞中進(jìn)行了相似的實(shí)驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)中用到的主要技術(shù)包括：1)RT-PCR檢測(cè)胚胎成纖維細(xì)胞中棕櫚?；D(zhuǎn)移酶的表達(dá)；2）Western Blot以及RT-PCR檢測(cè)DNA損傷應(yīng)激相關(guān)蛋白如ATM、p53、p21、Bax等的表達(dá)；3)免疫組化檢測(cè) DNA損傷灶的形成；4)細(xì)胞流式檢測(cè)細(xì)胞周期的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：A)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞中表達(dá)幾乎全部的棕櫚?；D(zhuǎn)移酶，并且當(dāng)阿

4、霉素作用時(shí)，棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶的表達(dá)出現(xiàn)了相當(dāng)大的變化；B)當(dāng)棕櫚?；揎棻?-溴十六酸抑制時(shí)，DNA損傷應(yīng)激出現(xiàn)了異常，具體表現(xiàn)為：ATM-p53表達(dá)激活異常、細(xì)胞周期阻滯的異常、DNA損傷修復(fù)異常、細(xì)胞凋亡因子表達(dá)異常等；C)zDHHC16-/-細(xì)胞中表現(xiàn)出相似的DNA損傷應(yīng)激異常，如：ATM-p53表達(dá)異常、DNA損傷修復(fù)異常等。這些結(jié)果表明棕櫚?；揎椨绕涫亲貦磅；D(zhuǎn)移酶zDHHC16在DNA損傷應(yīng)激中扮演了非常重要的角色。