遠(yuǎn)端缺血預(yù)處理對缺血再灌注后腎功能的作用及機制.pdf

1、本文對遠(yuǎn)端缺血預(yù)處理對缺血再灌注后腎功能的作用及機制進(jìn)行了研究。本研究分為兩個部分：
　　第一部分：急性腎缺血再灌注模型建立。
　　背景：急性腎損傷（Acute Kidney Injury，AKI）是一種常見的臨床綜合征，主要表現(xiàn)為腎功能的急性快速下降及代謝廢物的累積。在外科手術(shù)中，因器官缺血再灌注損傷引起的急性腎損傷是臨床上常見的一種術(shù)后并發(fā)癥，它可導(dǎo)致術(shù)后死亡率升高。因此在開展急性腎缺血再灌注損傷研究的基礎(chǔ)是建立合適的動

2、物模型。本研究中采用雄性Sprague-Dawley大鼠，在預(yù)實驗基礎(chǔ)上，綜合既往研究的實驗方案，建立合適的急性腎缺血再灌注模型。
　　方法：雄性Sprague-Dawley大鼠隨機分為2組：假手術(shù)組（Sham）：開腹，只分離左右兩側(cè)腎蒂，關(guān)腹；急性缺血再灌注組（IR）：開腹，分離左右兩側(cè)腎蒂，采用微創(chuàng)血管夾夾閉左側(cè)腎蒂的同時摘除右側(cè)腎臟，夾閉45 min后，松開血管夾，恢復(fù)血液灌流，關(guān)腹。所有分組在術(shù)后6 h和24 h時間節(jié)點分

3、別處死并進(jìn)行相應(yīng)的標(biāo)本收集來檢測血液中的肌酐（Creatinine，Cr）、尿素氮（Blood Urea Nitrogen，BUN）和腎組織中的髓過氧化物酶（Myeloperoxidase，MPO）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）和超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD），對左腎組織行蘇木精—伊紅染色（Hematoxylin-Eosin Staining，HE）評估病理變化并進(jìn)行腎小管評分。<

4、br>　　結(jié)果：1.從腎功能指標(biāo)Cr、BUN和氧化損傷指標(biāo)MPO、MDA、SOD和腎小管評分來看，IR組均較Sham組在6 h和24 h這兩個時間節(jié)點均顯著升高（P＜0.001），腎臟損傷加重。2.在術(shù)后24 h內(nèi)，IR組腎臟損傷逐漸加重，在24 h達(dá)到高值。
　　結(jié)論：采取左腎缺血45min，右腎摘除的方式可以建立合適的急性腎缺血再灌注損傷模型。
　　第二部分：遠(yuǎn)端缺血預(yù)處理對缺血再灌注后腎功能的保護(hù)作用比較。
　　

5、目的：在泌尿外科手術(shù)如腎部分切除術(shù)、腎移植手術(shù)中，腎臟會面臨一段缺血過程，即使血流復(fù)灌仍將導(dǎo)致缺血再灌注損傷（Ischemia-Reperfusion Injury，IRI）。為減少缺血再灌注損傷，保護(hù)措施如缺血預(yù)處理（Ischemic Preconditioning，IPC）現(xiàn)象被發(fā)現(xiàn)。IPC最初運用于心血管系統(tǒng)的預(yù)處理來實現(xiàn)對心臟的保護(hù)。為了規(guī)避IPC對靶器官血管的壓迫損傷，“升級版”遠(yuǎn)端缺血預(yù)處理現(xiàn)象（Remote Ischemi

6、c Preconditioning，RIPC）出現(xiàn)。RIPC能運用于心外器官，并且不同時期—即刻期RIPC（Acute Phase RIPC）和延遲期RIPC（Delayed Phase RIPC）保護(hù)作用不同。RIPC在泌尿外科領(lǐng)域的運用尚處于早期研究階段，對腎功能的保護(hù)作用仍具有爭議性。在對 RIPC作用機制研究中，缺氧誘導(dǎo)因子-1（Hypoxia-Inducible Factor-1，HIF-1）可能參與其中。為此，本部分主要探討

7、RIPC對缺血再灌注后腎功能的保護(hù)作用及HIF-1在RIPC中的作用。
　　方法：雄性Sprague-Dawley大鼠隨機分為4組：假手術(shù)組（Sham）：開腹，只分離左右兩側(cè)腎蒂，關(guān)腹；急性缺血再灌注組（IR）：開腹，分離左右兩側(cè)腎蒂，采用微創(chuàng)血管夾夾閉左側(cè)腎蒂的同時摘除右側(cè)腎臟，夾閉45 min后，松開血管夾，恢復(fù)血液灌流，關(guān)腹。3.即刻期RIPC預(yù)處理組（Acute）：予以RIPC預(yù)處理后，即刻采取同IR組措施。4.延遲期RI

8、PC預(yù)處理組（Delayed）：予以RIPC預(yù)處理24 h后，采取同IR組措施。所有分組在術(shù)后24 h時間節(jié)點分別處死并進(jìn)行相應(yīng)的標(biāo)本收集來檢測血液中的肌酐（Creatinine，Cr）、尿素氮（Blood Urea Nitrogen，BUN）和腎組織中的髓過氧化物酶（Myeloperoxidase，MPO）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）和超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD），對左腎組織

9、行蘇木精-伊紅染色（Hematoxylin-Eosin Staining，HE）評估病理變化并進(jìn)行腎小管評分。此外，檢測HIF-1α的免疫印跡（Western Blot，WB）和免疫組化（Immunohistochemistry，IHC）表達(dá)，以及血液中腎上腺髓質(zhì)素（Adrenomedullin，ADM）的檢測。
　　結(jié)果：1.從腎功能指標(biāo)Cr、BUN和氧化損傷指標(biāo)MPO、MDA、SOD和腎小管評分來看，Acute、Delayed

10、組均較 IR組顯著改善（P＜0.05），腎臟損傷減輕，保護(hù)效果顯著。2. Delayed組在BUN、MPO和腎小管評分上顯著優(yōu)于Acute組（P＜0.05），保護(hù)效果較Acute組好。3.經(jīng)RIPC預(yù)處理后，HIF-1α表達(dá)水平在Acute和Delayed組較IR組顯著提高（P＜0.05），且Delayed組與Acute組相比具有更高的表達(dá)（P＜0.05）。延遲期 RIPC可顯著提高血液中腎上腺髓質(zhì)素（ADM）水平（P＜0.001）。<