MPTP介導(dǎo)TRPV1抑制小鼠急性心肌梗死后細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用.pdf

1、背景：
　　在心肌缺血時(shí)，瞬時(shí)受體電位香草酸亞型1(transient receptor potential vanilloid1,TRPV1)被激活，通過傳導(dǎo)心絞痛信號(hào)和釋放神經(jīng)肽，從而減輕心肌梗死后心肌細(xì)胞凋亡。目前，TRPV1抑制心肌梗死后凋亡作用的具體機(jī)制尚不清楚。近年來的研究表明，線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔(Mitochondrial permeability transitionpore,MPTP)的開放與心肌細(xì)胞缺血再灌注損

2、傷密切相關(guān)，抑制其開放可減輕心肌缺血后心肌細(xì)胞凋亡。
　　目的：
　　探討瞬時(shí)受體電位香草酸亞型1激活是否通過抑制線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔開放抑制小鼠心肌梗死后細(xì)胞凋亡。
　　方法：
　　首先，本研究利用左冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎術(shù)建立了野生型（WT）和TRPV1基因敲除（TRPV1-/-）兩種小鼠的心肌梗死模型，輔以環(huán)孢素A（CSA）預(yù)處理抑制MPTP開放，比較觀察TRPV1、MPTP在心肌梗死中的作用。分別進(jìn)行心肌損傷測

3、定及線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔開放性測定。
　　結(jié)果：
　　本研究證明，TRPV1激活通過抑制MPTP開放而減少心肌細(xì)胞凋亡。心肌組織切片氯化三苯基四氮唑（TTC）染色顯示，心肌缺血24 h后，TRPV1-/-小鼠的心肌梗死面積明顯大于WT型小鼠，而經(jīng)CSA預(yù)處理的 TRPV1-/-小鼠比TRPV1-/-小鼠梗死面積明顯減小。TUNEL檢測心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)（AI）揭示，WT型心肌梗死小鼠的AI明顯低于TRPV1-/-心肌梗死小鼠，而

4、CSA預(yù)處理明顯降低TRPV1-/-小鼠心肌細(xì)胞的AI。Western印跡檢測胱天蛋白酶3(caspase3)、胱天蛋白酶9(caspase9)、p53、Bcl-2/Bax比值和細(xì)胞色素C（Cyt-C)水平。結(jié)果證明，TRPV1的激活可抑制MPTP的開放，減少線粒體Cyt-C的外溢，降低caspase9和caspase3的表達(dá)。GENMEN光度法檢測MPTP開放實(shí)驗(yàn)顯示，激活的TRPV1明顯抑制MPTP的開放。本研究證實(shí)，急性心肌梗死后