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文檔簡介
1、目的:
目的是研究三七姜揮發(fā)油對人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞侵襲和遷移的抑制作用,并探討其可能機(jī)制。
方法:
體外培養(yǎng)人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞,CCK8實(shí)驗(yàn)檢測三七姜揮發(fā)油對CNE-2細(xì)胞增值能力的抑制作用,計(jì)算生長抑制率及半數(shù)抑制濃度(IC50);選取三七姜揮發(fā)油(0,20,40,60μg·ml-1)作用于CNE-2細(xì)胞0,24,48h,分別于三個(gè)不同時(shí)間段,采用劃痕實(shí)驗(yàn)檢測三七姜揮發(fā)油對CNE-2細(xì)胞遷移能力的
2、抑制作用;Transwell實(shí)驗(yàn)檢測三七姜揮發(fā)油對CNE-2細(xì)胞侵襲能力的抑制作用。取作用48h后的CNE-2細(xì)胞,采用蛋白印跡法檢測MMP-2、MMP-9和VEGF等侵襲和遷移相關(guān)基因蛋白水平的表達(dá);RT-PCR技術(shù)檢測MMP-2、MMP-9和VEGF等相關(guān)侵襲和遷移基因的表達(dá)情況。
結(jié)果:
三七姜揮發(fā)油作用于CNE-2細(xì)胞24h,48h,72h后,細(xì)胞半數(shù)抑制濃度分別為70.296μg·ml-1,63.749μg
3、·ml-1,59.532μg·ml-1,呈時(shí)間-劑量依賴性(P<0.05);不同濃度的三七姜揮發(fā)油(0,20,40,60μg·ml-1)作用于細(xì)胞48h后,劃痕實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)與空白對照組相比,細(xì)胞的遷移能力隨著藥物濃度的增加而降低;Transwell實(shí)驗(yàn)顯示,隨著藥物濃度逐漸的增加,細(xì)胞的侵襲能力逐漸下降;RT-PCR顯示,與陰性對照組相比,MMP-2、MMP-9和VEGF等基因表達(dá)下調(diào),且變化趨勢呈一定的濃度依賴性。蛋白免疫印跡法顯示,與陰
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