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1、目的:研究五倍子提取物鞣花酸對(duì)鼻咽癌CNE-2細(xì)胞增殖和凋亡的影響,探討鞣花酸抗鼻咽癌的生物學(xué)作用及其可能的機(jī)制。
方法:培養(yǎng)鼻咽癌CNE-2細(xì)胞24 h后,設(shè)為4組實(shí)驗(yàn)組,3組藥物組分別加入(2、4、6 mg/l)的鞣花酸干預(yù),對(duì)照組(即0 mg/l)不干預(yù)。1.鞣花酸干預(yù)48h后,顯微鏡下與對(duì)照組比較觀察鞣花酸對(duì)鼻咽癌CNE-2細(xì)胞的形態(tài)的變化。2.鞣花酸干預(yù)48h后,Hoechst33258法染色,與對(duì)照組比較觀察鞣花酸
2、對(duì)鼻咽癌CNE-2細(xì)胞凋亡的作用。3.分別于鞣花酸干預(yù)24h、48h、72h后,MTT實(shí)驗(yàn)分析,與對(duì)照組相比鞣花酸對(duì)鼻咽癌CNE-2細(xì)胞增殖的影響。4.鞣花酸干預(yù)48h后,流式細(xì)胞儀分析,與對(duì)照組比較鞣花酸對(duì)鼻咽癌 CNE-2細(xì)胞凋亡率的影響。5.鞣花酸干預(yù)48h后, Western-blot檢測(cè),與對(duì)照組相比鞣花酸對(duì)鼻咽癌CNE-2細(xì)胞中COX-2、NF-κB的表達(dá)的影響。
結(jié)果:1.濃度為(0、2、4、6mg/l)的鞣花酸
3、干預(yù)鼻咽癌CNE-2細(xì)胞后,隨藥物濃度的增大,漂浮的死亡細(xì)胞數(shù)量隨之增加。鼻咽癌CNE-2活細(xì)胞數(shù)量隨藥物濃度的增大而明顯減少。2. Hoechst33258染色后,隨藥物濃度的增大,鼻咽癌CNE-2染色細(xì)胞減少,而細(xì)胞核濃縮、核破裂的數(shù)量隨藥物濃度的增大而增多。3. MTT法檢測(cè),隨藥物濃度的增加,鼻咽癌CNE-2細(xì)胞明顯的生長(zhǎng)抑制現(xiàn)象隨之增加,呈濃度依賴性。3.流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示:鞣花酸處理鼻咽癌CNE-2細(xì)胞48h后,藥物組(2、
4、4、6 mg/l)凋亡率分別為:(19.17%±0.91%、38.44%±3.13%、61.74%±4.28%),與對(duì)照組(0.21%±0.08%)相比,藥物組凋亡現(xiàn)象明顯(P<0.05),藥物組之間兩兩比較差異明顯,藥物濃度越高,凋亡越明顯(P<0.05)。3. Western-blot檢測(cè)結(jié)果:各藥物組COX-2、NF-κB與對(duì)照組的比較均表達(dá)降低,濃度越高,表達(dá)越低。
結(jié)論:鞣花酸能抑制鼻咽癌CNE-2細(xì)胞的增殖,誘導(dǎo)其
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