重組人白介素-1受體拮抗劑治療大鼠顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物模型研究.pdf

1、目的：
　　探討II型膠原酶對(duì)大鼠髁突軟骨基質(zhì)降解的影響以及重組人白細(xì)胞介素-1受體拮抗劑（IL-1Ra)對(duì)大鼠TMJOA的治療作用，為臨床TMJOA的治療研究提供一定理論依據(jù)。
　　方法：
　　1、選取2月齡雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，采取一次性單側(cè)顳下頒關(guān)節(jié)腔II型膠原酶注射法建立大鼠TMJOA動(dòng)物模型，對(duì)照側(cè)注射等量生理鹽水，利用H E染色及改良Mankin評(píng)分法研究I I型膠原酶對(duì)大鼠TMJ髁

2、突軟骨組織形態(tài)的影響；
　　2、同前法建立大鼠TMJOA單側(cè)模型，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)、免疫組化染色( IHC)等實(shí)驗(yàn)手段探索ADAMTS-4，ADAMTS-5在大鼠TMJOA中的表達(dá)變化；3、同前法建立大鼠TMJOA雙側(cè)模型，一周后實(shí)驗(yàn)側(cè)顳下頒關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射重組人IL-1Ra，對(duì)照側(cè)注射等量生理鹽水，采用H E、免疫組化染色、RT-PCR等實(shí)驗(yàn)手段研究大鼠TMJ髁突軟骨組織形態(tài)改變及ADAMTS-4、ADAMTS-5的

3、表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1、實(shí)驗(yàn)側(cè)髁突軟骨出現(xiàn)退行性變，表現(xiàn)為髁突軟骨及關(guān)節(jié)盤(pán)表面膠原纖維逐步裂解，軟骨細(xì)胞數(shù)量減少，層次紊亂；對(duì)照側(cè)髁突軟骨及關(guān)節(jié)盤(pán)表面光滑連續(xù)，細(xì)胞排列層次清楚，依次分為纖維層、增殖層、肥大層和鈣化軟骨層；實(shí)驗(yàn)側(cè)1周時(shí)評(píng)分為：0.67±0.58，2周時(shí)為：1.67±0.58;3周時(shí)為：2.67±0.58;4周時(shí)為：6.00±1.00。實(shí)驗(yàn)側(cè)4周時(shí)病損最為嚴(yán)重（P<0.05);
　　2、實(shí)驗(yàn)側(cè)ADAM

4、TS-4，A D A M T S-5陽(yáng)性細(xì)胞主要表達(dá)于增殖層和肥大層，在4周時(shí)突入纖維層。對(duì)照側(cè)主要表達(dá)于肥大層。實(shí)驗(yàn)側(cè)ADAMTS-4，ADAMTS-5 mRNA與蛋白表達(dá)在4周時(shí)均高于對(duì)照側(cè)（P<0.05)，且在4周時(shí)均高于2周實(shí)驗(yàn)側(cè)（P<0.05)。實(shí)驗(yàn)側(cè)ADAMTS-5 mRNA在2周，蛋白在4周時(shí)表達(dá)高于ADAMTS-4(P<0.05)。
　　3、實(shí)驗(yàn)側(cè)關(guān)節(jié)病變較對(duì)側(cè)輕，病變多局限于髁突軟骨及關(guān)節(jié)盤(pán)表面。對(duì)照側(cè)髁突軟骨及

5、關(guān)節(jié)盤(pán)表面膠原纖維裂解，關(guān)節(jié)軟骨萎縮，軟骨細(xì)胞數(shù)量減少，層次紊亂。實(shí)驗(yàn)側(cè)2周時(shí)評(píng)分為：1.33±0.52，對(duì)照側(cè)為：2.00±0.63。兩者無(wú)明顯差異(尸>0.05)；實(shí)驗(yàn)側(cè)4周時(shí)評(píng)分為：3.00±0.63，對(duì)照側(cè)為：6.50±0.84。實(shí)驗(yàn)側(cè)關(guān)節(jié)軟骨病損明顯較對(duì)側(cè)輕（P<0.05)。
　　實(shí)驗(yàn)側(cè)ADAMTS-4，ADAMTS-5陽(yáng)性細(xì)胞主要表達(dá)于肥大層。對(duì)照側(cè)表達(dá)于纖維層、增殖層及肥大層。實(shí)驗(yàn)側(cè)ADAMTS-4，ADAMTS-5

6、 m R N A與蛋白表達(dá)在4周時(shí)均低于對(duì)照側(cè)（P<0.05)。實(shí)驗(yàn)側(cè)ADAMTS-5 mRNA在2周和4周時(shí)均高于ADAMTS-4(尸<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、ADAMTS-4，ADAMTS-5均在大鼠TMJOA病變?cè)缙谄鹱饔?，相比ADAMTS-4，ADAMTS-5的作用更為明顯；
　　2、IL-1Ra可促進(jìn)早期TMJOA大鼠髁突軟骨的修復(fù)，其治療機(jī)制可能為抑制蛋白聚糖酶的表達(dá)，相比ADAMTS-5，IL-