新型萘酰亞胺衍生物SLP9、SLP11抗腫瘤作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：本課題研究新型萘酰亞胺衍生物SLP9和SLP11的體內(nèi)和體外抗腫瘤作用及分子機(jī)制，為萘酰亞胺衍生物的研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)與理論參考。
　　方法：通過MTT實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)SLP9、SLP11對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2、SMMC-7721，結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-116、HT-29，乳腺癌細(xì)胞MCF-7、MDA-MB-231增殖的抑制作用。通過Annexin V/PI雙染分別檢測(cè)SLP9、SLP11誘導(dǎo)HepG2、SMMC-7721和HCT-11

2、6細(xì)胞凋亡作用。通過AO/EB熒光染色分別從形態(tài)學(xué)上檢測(cè)SLP9、SLP11誘導(dǎo)HepG2、SMMC-7721、HCT-116細(xì)胞凋亡作用。通過Western blot實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)SLP9、SLP11作用于HepG2、SMMC-7721、HCT-116細(xì)胞后，對(duì)PARP-1、Caspase-3、Bcl-2、BaX蛋白的表達(dá)的影響。通過昆明小鼠移植性肝癌H22腋下實(shí)體瘤模型、H22肺轉(zhuǎn)移模型和BALB/c小鼠結(jié)腸癌CT-26肺轉(zhuǎn)移模型探究

3、SLP9、SLP11的體內(nèi)抗腫瘤以及對(duì)肺轉(zhuǎn)移抑制作用。
　　結(jié)果：
　　1.SLP9對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2、SMMC-7721，結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-116、HT-29，乳腺癌細(xì)胞MCF-7、MDA-MB-231的增殖均有抑制作用。其對(duì)上述細(xì)胞作用48h，IC50分別為(5.49±0.24)μM、(3.05±0.62)μM、(7.25±0.84)μM、(10.40±0.78)μM、(17.53±1.06)μM、(11.46±0.9

4、6)μM。
　　SLP11對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2、SMMC-7721，結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-116、HT-29，乳腺癌細(xì)胞MCF-7、MDA-MB-231的增殖均有抑制作用。其對(duì)上述細(xì)胞作用48h，IC50分別為(6.55±0.48)μM、(4.20±0.66)μM、(7.28±0.43)μM、(18.08±1.24)μM、(12.52±1.11)μM、(11.05±0.64)μM。
　　2.SLP9對(duì)HepG2、SMMC-772

5、1、HCT-116細(xì)胞有誘導(dǎo)凋亡作用，并且呈時(shí)間和濃度依賴性。10μM SLP9處理這三種細(xì)胞48h，凋亡率分別達(dá)到：(39.21±11.83)％、(64.83±7.39)%、(49.50±4.72)%。AO/EB熒光染色法從細(xì)胞形態(tài)上證實(shí)SLP9能誘導(dǎo)HepG2、SMMC-7721、HCT-116細(xì)胞的凋亡。
　　SLP11對(duì)HepG2、SMMC-7721、HCT-116細(xì)胞有誘導(dǎo)凋亡作用，并且呈時(shí)間和濃度依賴性。10μM SL

6、P11處理這三種細(xì)胞48h，凋亡率分別達(dá)到：(35.06±3.48)%、(41.21±2.83)%、(36.35±12.57)%。AO/EB熒光染色法從細(xì)胞形態(tài)上證實(shí)SLP11能誘導(dǎo)HepG2、SMMC-7721、HCT-116細(xì)胞的凋亡。
　　3.Western Blot實(shí)驗(yàn)證明SLP9通過PARP-1激活和Caspase-3介導(dǎo)途徑引起細(xì)胞凋亡，同時(shí)Bcl-2家族成員參與調(diào)節(jié)凋亡：表現(xiàn)出抗調(diào)成員Bcl-2下調(diào)，促調(diào)成員Bax上

7、調(diào)。
　　Western Blot實(shí)驗(yàn)證明SLP11通過PARP-1激活和Caspase-3介導(dǎo)途徑引起細(xì)胞凋亡，同時(shí)Bcl-2家族成員參與調(diào)節(jié)凋亡：表現(xiàn)出抗調(diào)成員Bcl-2下調(diào)，促調(diào)成員Bax上調(diào)。
　　4.通過昆明小鼠H22腋下實(shí)體瘤模型和H22肺轉(zhuǎn)移模型實(shí)驗(yàn)得出Amonafide、SLP9可以抑制實(shí)體瘤的生長(zhǎng)和肺轉(zhuǎn)移，抑瘤率和抑制轉(zhuǎn)移率分別是：45.26%，52.63%和
　　39.81%，76.70%，SLP9

8、作用強(qiáng)于Amonafide。通過BALB/c小鼠CT-26肺轉(zhuǎn)移模型實(shí)驗(yàn)得出Amonafide、SLP9可以抑制CT-26的肺轉(zhuǎn)移，抑制轉(zhuǎn)移率是：62.88%，86.71%，SLP9作用強(qiáng)于Amonafide。
　　通過昆明小鼠H22腋下實(shí)體瘤模型和H22的肺轉(zhuǎn)移模型實(shí)驗(yàn)得出SLP11可以抑制實(shí)體瘤的生長(zhǎng)和H22的肺轉(zhuǎn)移，抑瘤率和抑制轉(zhuǎn)移率分別是：49.47%和58.25%，SLP11作用強(qiáng)于Amonafide。通過BALB/c小