藍(lán)斑去甲腎上腺素能神經(jīng)元在斑馬魚(yú)全身麻醉中的作用.pdf

1、背景與目的：全身麻醉藥廣泛應(yīng)用于臨床已有近170年歷史，而其引起意識(shí)消失等麻醉狀態(tài)發(fā)生的神經(jīng)機(jī)制仍然不清楚。最近的研究表明，大腦中的藍(lán)斑-去甲腎上腺素（locus coeruleus– norepinephrine，LC-NE）能調(diào)質(zhì)系統(tǒng)在全麻狀態(tài)的調(diào)節(jié)中起到重要作用，但關(guān)于麻醉藥是如何作用于LC-NE系統(tǒng)的分子和突觸機(jī)制并不清楚。
　　方法：通過(guò)監(jiān)測(cè)斑馬魚(yú)幼魚(yú)的運(yùn)動(dòng)行為和腦電活動(dòng)，建立了丙泊酚或依托咪酯介導(dǎo)的斑馬魚(yú)全身麻醉模型。

2、通過(guò)雙光子激光損毀斑馬魚(yú)藍(lán)斑神經(jīng)元，或者基因敲除多巴胺β羥化酶（dopamine-β-hydroxylase knockout，DBH KO），我們檢測(cè)了LC-NE系統(tǒng)在斑馬魚(yú)全身麻醉中的作用。進(jìn)一步，通過(guò)對(duì)LC神經(jīng)元進(jìn)行在體（in vivo）全細(xì)胞膜片鉗記錄，揭示了麻醉藥對(duì)LC神經(jīng)元的作用及突觸機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　1.結(jié)合行為學(xué)實(shí)驗(yàn)及局部場(chǎng)電位（local field potential，LFP）和脊髓外周運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的

3、電生理記錄，本研究首次建立了斑馬魚(yú)全身麻醉模型。
　　2.發(fā)現(xiàn)了 LC損毀的斑馬魚(yú)對(duì)丙泊酚和依托咪酯麻醉都表現(xiàn)出更快的誘導(dǎo)時(shí)間和更長(zhǎng)的蘇醒時(shí)間。
　　3.發(fā)現(xiàn)了多巴胺β羥化酶缺失的斑馬魚(yú)對(duì)丙泊酚和依托咪酯麻醉表現(xiàn)出更快的誘導(dǎo)時(shí)間和更長(zhǎng)的蘇醒時(shí)間。
　　4.通過(guò)對(duì) LC神經(jīng)元進(jìn)行全細(xì)胞膜片鉗記錄，發(fā)現(xiàn)了局部使用丙泊酚和依托咪酯對(duì)LC神經(jīng)元的自發(fā)放電都有顯著的抑制作用，并且引起膜電位的超極化。
　　5.通過(guò)電壓鉗模式

4、記錄 LC神經(jīng)元，發(fā)現(xiàn)了自發(fā)的興奮性突觸后電流（spontaneous excitatory postsynaptic currents，sEPSCs）也可以被麻醉藥所抑制，同時(shí)還引起外向電流。
　　6.發(fā)現(xiàn)了GABAA受體抑制劑PTX（picrotoxin）能消除丙泊酚和依托咪酯引起的膜電位超極化。
　　結(jié)論：
　　1. LC-NE系統(tǒng)在靜脈麻醉藥（丙泊酚和依托咪酯）全身麻醉中起到重要的作用。
　　2.丙泊酚和