MACC1與c-Met蛋白在食管癌中的表達(dá)及相關(guān)性研究.pdf

1、背景：
　　癌基因的激活在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1（Metastasis-associated in colon cancer1,MACC1）是近年來新發(fā)現(xiàn)一種的癌基因（oncogene），已有的報道證實其參與了結(jié)腸癌、肝癌、肺癌等多種腫瘤的發(fā)病過程。后續(xù)的研究還發(fā)現(xiàn)，MACC1的表達(dá)和肝細(xì)胞生長因子（hepatocyte growth factor, HGF）及其受體(receptor tyrosin

2、e kinases,c-Met)的激活調(diào)節(jié)有關(guān)，HGF/c-Met信號通路已被證明參與多種腫瘤的發(fā)病過程。然而，MACC1是否通過影響HGF/c-Met信號通路參與了食管癌的發(fā)生發(fā)展過程并不清楚。本研究擬通過檢測食管癌組織中MACC1及c-Met蛋白的表達(dá)情況，尋找MACC1參與食管癌發(fā)病的臨床證據(jù)，并通過分析MACC1與c-Met蛋白的表達(dá)相關(guān)性來探討MACC1參與食管癌發(fā)病的潛在作用機制。
　　方法：
　　1．隨機入組2

3、006年6月至2009年6月期間在中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院胸腔外科行手術(shù)治療的食管癌患者88例并收集術(shù)中切除的腫瘤組織，術(shù)前未行任何治療，包括放療及化療。結(jié)合影像學(xué)資料及手術(shù)探查情況、進(jìn)行TNM分期判定，經(jīng)中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院病理科診斷組織病理分期及分化程度。食管癌組織經(jīng)免疫組織化學(xué)染色后按照半定量積分法進(jìn)行結(jié)果判定。本研究中兩組資料間的比較采用Mann-Whitney U檢驗，采用Kruskal-Wallis

4、H檢驗比較3組及3組以上資料間的差異，相關(guān)性分析采用spearman秩相關(guān)檢驗。
　　2．Real-time RT-PCR法、Western blot方法檢測食管癌組織中MACC1、c-Met基因和蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1．免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示MACC1與c-Met蛋白主要在食管癌細(xì)胞的胞質(zhì)中表達(dá)。
　　2．MACC1蛋白在食管鱗癌中的陽性表達(dá)率為88.64％。其中，男性患者中的陽性表達(dá)率為90.00

5、%，女性患者中的陽性表達(dá)率為83.33%，兩者之間無明顯差異（P=0.733）；60及以上周歲患者中的陽性表達(dá)率為88.68%，60周歲以下患者中的陽性表達(dá)率為88.57%，兩者之間無明顯差異（P=0.979）。MACC1蛋白在病理分級Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ級腫瘤組織中的陽性表達(dá)率分別為14.29%、93.65%、100.00%；在TNM分期Ⅰ/Ⅱa/Ⅱb/Ⅲ期腫瘤組織中的陽性表達(dá)率分別為16.67%、89.47%、100.00%、100.00%。

6、經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，MACC1的表達(dá)在不同病理分級和 TNM分期中具有顯著性差異（P值均＜0.001）。
　　3．c-Met蛋白在食管鱗癌中的陽性表達(dá)率為75.00%。其中，男性患者中的陽性表達(dá)率為78.57%，女性患者中的陽性表達(dá)率為61.11%，兩者之間無明顯差異（P=0.197）；60及以上周歲患者中的陽性表達(dá)率為73.58%，60周歲以下患者中的陽性表達(dá)率為77.14%，兩者之間無明顯差異（P=0.887）。c-Met蛋白在病理

7、分級Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ級腫瘤組織中的陽性表達(dá)率分別為0.00%、76.19%、100.00%；在 TNM分期Ⅰ/Ⅱa/Ⅱb/Ⅲ期腫瘤組織中的陽性表達(dá)率分別為0.00%、100.00%、100.00%、100.00%。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，c-Met的表達(dá)在不同病理分級和TNM分期中具有顯著性差異（P值均＜0.001）。
　　4．MACC1蛋白在食管鱗癌中表達(dá)率高于c-Met蛋白，Spearman檢驗顯示二者表達(dá)在總的食管鱗癌、中低分級以及TNM分

8、期組間顯著相關(guān)（相關(guān)系數(shù)均＞0.398， P值均＜0.001，）。
　　5. real-time RT-PCR實驗結(jié)果顯示：相比于癌旁組織，MACC1和c-Met基因在食管癌組織中均高表達(dá)。Western Blot實驗結(jié)果顯示：相比于癌旁組織，MACC1和c-Met蛋白在食管癌組織中均高表達(dá)。
　　結(jié)論：
　　1．IHC法檢測MACC1和c-Met蛋白在食管癌組織中均有較高的陽性表達(dá)率，而且表達(dá)高低與食管癌的病理分級及

9、TNM分期相關(guān)，與年齡及性別無明顯相關(guān)性，表明MACC1和c-Met蛋白可能在食管癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。
　　2．MACC1和 c-Met蛋白在食管癌中的表達(dá)具有明顯的相關(guān)性，提示 MACC1可能通過影響HGF/c-Met信號通路來參與食管癌的發(fā)病過程。
　　3．real-time RT-PCR和Western Blot方法檢測MACC1、c-Met基因和蛋白在食管癌組織中均有較高的表達(dá)，從組織學(xué)上進(jìn)一步證實了MAC