膽汁酸升高的慢性乙型肝炎患者T細(xì)胞免疫衰老及肝細(xì)胞癌風(fēng)險(xiǎn)升高.pdf

1、隨著年齡的增加，天然免疫與獲得性免疫系統(tǒng)功能進(jìn)行性的退化，最終導(dǎo)致免疫力的降低，這個(gè)現(xiàn)象通常被稱為免疫衰老。免疫衰老通常被認(rèn)為與老年人對(duì)疫苗免疫反應(yīng)減低、易于遭受病毒或細(xì)菌感染、易于發(fā)生癌癥相關(guān)。作為獲得性免疫系統(tǒng)的主要組成，免疫衰老過程中T細(xì)胞的功能退化有著最多的關(guān)注。T細(xì)胞免疫衰老通常表型為T細(xì)胞免疫系統(tǒng)多個(gè)層面上的退行性變化，其中包括：naive T細(xì)胞數(shù)量下降，TCR(T細(xì)胞受體) repertoire多樣性降低，T細(xì)胞端?？s短

2、，memory T細(xì)胞功能下降等。
　　目前研究結(jié)果表明慢性病原體感染對(duì)于機(jī)體免疫系統(tǒng)有著負(fù)面的影響。在本研究中，分析了是否CHB(慢性乙型肝炎)患者其T細(xì)胞免疫系統(tǒng)受損，同時(shí)也分析了是否 CHB患者 T細(xì)胞免疫系統(tǒng)受損與其發(fā)生 HCC(肝細(xì)胞癌)相關(guān)。
　　比較了24例CHB患者和15例健康人其naive T細(xì)胞庫(kù)的TCR repertoire。與以前研究報(bào)道結(jié)果一致，健康人40歲以前其naive T細(xì)胞庫(kù)的TCR rep

3、ertoire多樣性沒有明顯降低保持在高水平。與健康人不同，CHB患者40歲以前其naive T細(xì)胞庫(kù)的TCR repertoire多樣性隨著年齡的增加顯著降低。考慮到這24例CHB患者都是通過垂直傳播感染的HBV(乙型肝炎病毒)，認(rèn)為其naive T細(xì)胞庫(kù)的TCR repertoire多樣性的降低是由于HBV病毒與T細(xì)胞免疫系統(tǒng)長(zhǎng)期作用的結(jié)果而不是由年齡增加造成的。和健康人naive T細(xì)胞庫(kù)一樣，沒有表達(dá)特定TCR克隆型的T細(xì)胞克隆

4、在naive T細(xì)胞庫(kù)中占據(jù)主導(dǎo)地位，這表明CHB患者其naive T細(xì)胞庫(kù)的TCR repertoire多樣性的降低不是由某些特定TCR克隆型的T細(xì)胞克隆優(yōu)勢(shì)性的擴(kuò)增導(dǎo)致，而很可能反映了CHB患者其naive T細(xì)胞庫(kù)T細(xì)胞克隆均勻性的丟失。這部分研究的發(fā)現(xiàn)表明慢性CHB感染能夠加速CHB患者的T細(xì)胞免疫衰老。
　　Naive T細(xì)胞庫(kù)的TCR repertoire多樣性的降低意味著CHB患者外周T細(xì)胞庫(kù)的維持失衡。成年人外周T

5、細(xì)胞庫(kù)的維持主要通過T細(xì)胞的緩慢增殖來實(shí)現(xiàn)。首先，分析了146例CHB患者及53例健康人外周T細(xì)胞的增殖情況。與健康人相比，CHB患者外周T細(xì)胞增殖水平顯著升高。部分CHB患者外周T細(xì)胞的增殖水平升高到了HIV-1(人免疫缺陷病毒1型)感染的水平。CHB患者血清TBA(總膽汁酸)水平與其外周T細(xì)胞增殖水平升高顯著相關(guān)，這主要體現(xiàn)在：從定性的角度分析，血清TBA升高的CHB患者其所有T細(xì)胞亞群(包括naive T細(xì)胞和memory T細(xì)胞

6、)的增殖頻率相對(duì)于血清TBA正常的CHB患者及健康人都顯著升高；從定量的角度分析，血清TBA升高的CHB患者其外周T細(xì)胞的增殖頻率與其血清TBA顯著正相關(guān)。我們也分析了CHB患者其外周T細(xì)胞增殖水平升高與其它 CHB相關(guān)的臨床指標(biāo)的相關(guān)性，沒有發(fā)現(xiàn)類似的顯著相關(guān)性。隨后，分析了11例血清TBA持續(xù)升高的CHB患者兩個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)的T細(xì)胞增殖水平，發(fā)現(xiàn)其 T細(xì)胞在前后兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)都保持高水平增殖。這表明對(duì)于血清 TBA持續(xù)升高的CHB患者，其

7、外周 T細(xì)胞很可能一直保持在過度增殖狀態(tài)。進(jìn)一步，分析了12例血清TBA升高的CHB患者其外周T細(xì)胞的活化情況，同時(shí)比較了這12例CHB患者與3例健康人外周增殖的T細(xì)胞與靜息的T細(xì)胞其TCR Vβ家族的分布。血清TBA升高的 CHB患者其增殖的 T細(xì)胞上調(diào) CD38表達(dá)，顯示其免疫活化。盡管增殖水平差異巨大，血清 TBA升高的 CHB患者與健康人其增殖的 T細(xì)胞與靜息的 T細(xì)胞的TCR Vβ家族的分布都高度類似。這表明抗原非特異性的旁路

8、活化(By-stander Activation)機(jī)制主導(dǎo)了血清TBA升高的CHB患者其外周T細(xì)胞增殖水平的升高。最后，分析了5例健康人、21例有4年以上跟蹤的 CHB患者、4例 HBV相關(guān)的HCC患者其naive T細(xì)胞的端粒長(zhǎng)度。相對(duì)于健康人及跟蹤期內(nèi)血清TBA無升高或者僅一過性升高的CHB患者，跟蹤期內(nèi)血清TBA持續(xù)升高的CHB患者其naive T細(xì)胞的端粒長(zhǎng)度顯著縮短，縮短到了與HBV相關(guān)的HCC患者類似的水平。這部分的研究表明

9、CHB患者的T細(xì)胞免疫衰老與CHB患者血清TBA持續(xù)升高有緊密的相關(guān)性，很可能由血清TBA持續(xù)升高的CHB患者其外周T細(xì)胞長(zhǎng)期保持異常活化增殖導(dǎo)致。
　　為了研究血清TBA持續(xù)升高對(duì)于CHB患者發(fā)生 HCC的影響，做了一個(gè)回顧性的觀察性的隊(duì)列研究?；仡櫺匝芯康臄?shù)據(jù)來源于 HBS(西南醫(yī)院肝炎樣本庫(kù))項(xiàng)目2001年至2014年的數(shù)據(jù)，該樣本庫(kù)包含了到西南醫(yī)院傳染科就診的患者其人口統(tǒng)計(jì)學(xué)方面及臨床指標(biāo)方面的一系列記錄。按照我們的篩選標(biāo)

10、準(zhǔn)，一共有3021位CHB患者進(jìn)入最終隊(duì)列，其中3018(99.％)位在跟蹤期間都有定期的通過干擾素或者核苷類似物的抗病毒治療。利用 Cox proportional hazard models、Kaplan-Meier analyses、以及 propensity score analyses來分析血清 TBA持續(xù)升高與CHB患者發(fā)生HCC的相關(guān)性。分析選擇了性別、年齡、肝硬化、血清ALT(丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)、血清HBV DNA、以及

11、血清HBeAg(乙型肝炎e抗原)這幾個(gè)公認(rèn)的CHB患者HCC發(fā)生的危險(xiǎn)因素與血清TBA一起作為協(xié)變量(covariate)。CHB患者跟蹤期間血清TBA升高的持續(xù)程度由其血清TBA升高的跟蹤時(shí)間占其總跟蹤時(shí)間的比值決定。根據(jù)這個(gè)比值，把CHB患者其跟蹤期間血清TBA長(zhǎng)期變化模式按照升高的持續(xù)程度分為3群：血清TBA無升高或一過性升高、血清TBA中等水平的持續(xù)升高、血清TBA高水平的持續(xù)升高?；仡櫺匝芯靠偢櫰跒?0,813.7 pers

12、on-years，一共有81例CHB患者跟蹤期內(nèi)發(fā)生了HCC。在3021例隊(duì)列CHB患者中，血清TBA無升高或一過性升高的CHB患者為2139(70.8%)例，血清TBA中等水平的持續(xù)升高的CHB患者為520(17.2%)例，血清TBA高水平的持續(xù)升高的CHB患者為362(12.0%)例。整個(gè)跟蹤期內(nèi)，血清TBA長(zhǎng)期變化模式為無升高或一過性升高、中等水平的持續(xù)升高、及高水平的持續(xù)升高的CHB患者其HCC累積發(fā)病率分別為2.2%、6.3%

13、、及19.3%。相對(duì)于血清 TBA長(zhǎng)期變化模式為無升高或一過性升高的 CHB患者，血清 TBA長(zhǎng)期變化模式為中等水平的持續(xù)升高、及高水平的持續(xù)升高的 CHB患者其多因素校正(multivariate adjusted)之后的HRs(風(fēng)險(xiǎn)比)及95%CI(置信區(qū)間)分別為1.70(0.88-3.26)、及3.08(1.69-5.60)?；谠揌Rs值計(jì)算出來血清TBA長(zhǎng)期變化模式為中等水平的持續(xù)升高、及高水平的持續(xù)升高對(duì)于 HCC發(fā)生的

14、PARs(人群歸因危險(xiǎn)度)分別為7.8%、及29.0%。基于propensity score models的分析也驗(yàn)證了CHB患者其跟蹤期間血清TBA升高的持續(xù)程度與HCC發(fā)生的這種劑量-反應(yīng)關(guān)系(Dose-response Relationship)。這部分的研究表明，血清TBA的持續(xù)升高是定期接受抗病毒治療的CHB患者人群發(fā)生HCC的主要的、獨(dú)立的風(fēng)險(xiǎn)因素。
　　綜上所述，研究表明血清TBA的持續(xù)升高的 CHB患者其 HCC發(fā)