乙型肝炎病毒突變與肝細(xì)胞癌關(guān)系的研究.pdf

1、研究目的： 乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus，HBV)感染的常見(jiàn)結(jié)局是從無(wú)癥狀攜帶者發(fā)展為慢性乙型肝炎、肝硬化和肝細(xì)胞癌，是由乙肝病毒、宿主和環(huán)境相互作用的結(jié)果。病毒因素包括HIBV的基因突變、基因型、病毒載量和HBeAg狀態(tài)等，其中HBV基因突變是影響病毒生物學(xué)特性的重要因素之一，常見(jiàn)的突變包括前S區(qū)的PreS1和PreS2缺失突變、BCP區(qū)的T1762/A1764雙突變、前C區(qū)的A1896突變等，HBV突變有

2、可能改變病毒的復(fù)制能力和致病性、改變抗原表位而影響免疫應(yīng)答反應(yīng)、產(chǎn)生抗病毒藥物耐藥性等，既有可能引起持續(xù)感染，又有可能造成嚴(yán)重的肝細(xì)胞損傷。國(guó)內(nèi)外已有一些文獻(xiàn)報(bào)道了HBV基因突變與肝細(xì)胞癌的關(guān)系，研究表明前C區(qū)和BCP區(qū)某些突變可以影響HBeAg的表達(dá)、分泌或增加病毒復(fù)制能力，然而對(duì)前C區(qū)和BCP基因突變與肝癌關(guān)系的研究結(jié)果并不一致，對(duì)前S區(qū)的突變研究還比較有限，對(duì)上述觀點(diǎn)也有爭(zhēng)議，這可能與分析的樣本量較小以及研究設(shè)計(jì)類(lèi)型有關(guān)。本研究旨

3、在通過(guò)病例對(duì)照研究方法和Meta分析進(jìn)一步探討HBV突變與肝細(xì)胞癌發(fā)生之間的關(guān)系。 研究方法： 本研究以肝細(xì)胞癌患者為病例、選取慢性乙型肝炎(CHB)患者和無(wú)癥狀攜帶者(ASC)為對(duì)照，應(yīng)用Primer Premier5.0軟件設(shè)計(jì)引物，應(yīng)用巢式PCR擴(kuò)增，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行DNA測(cè)序，進(jìn)行多位點(diǎn)突變檢測(cè)，用MEGA4.0、DNASTAR5.0和Bioedit7.0軟件分析比對(duì)結(jié)果。通過(guò)對(duì)比分析HCC患者和CHB患者和AS

4、C樣本HBV在前S區(qū)和核心啟動(dòng)子區(qū)(Core promoter，CP)及前C區(qū)多個(gè)位點(diǎn)的突變發(fā)生率，分析HBV前S區(qū)、前C區(qū)和CP區(qū)基因突變與肝細(xì)胞癌的關(guān)系。Meta分析使用Cochrane協(xié)作網(wǎng)(www．cochrane．org)提供的Review Manager(RevMan)5.0和統(tǒng)計(jì)分析軟件Stata9.1同時(shí)進(jìn)行，系統(tǒng)全面檢索相關(guān)文獻(xiàn)、制定納入、排除標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)表、評(píng)價(jià)文獻(xiàn)質(zhì)量、統(tǒng)計(jì)分析集中報(bào)道的多個(gè)HBV突變位點(diǎn)，尤

5、其是報(bào)道不一致的突變位點(diǎn)，期望通過(guò)擴(kuò)大樣本量得到一個(gè)更加可靠的關(guān)于HBV突變與HCC關(guān)系的結(jié)論。使用Stata9.1和SPSS16.0軟件進(jìn)行卡方檢驗(yàn)、T檢驗(yàn)和多因素Logistic回歸等統(tǒng)計(jì)分析。 研究結(jié)論： HBV PreS，T1653，V1753和T1762/A1764突變?cè)黾親CC發(fā)生的危險(xiǎn)，這些單個(gè)或聯(lián)合突變對(duì)早期檢測(cè)和發(fā)現(xiàn)HCC有重要臨床意義，檢測(cè)這些突變有利于抗病毒治療的篩選和HCC預(yù)測(cè)。需要進(jìn)一步研究這些