miRNA-181a在人肺腺癌細胞中的表達及對細胞功能的影響.pdf

1、目的：研究 miRNA-181a在人肺腺癌細胞中的表達及轉(zhuǎn)染人肺腺癌耐藥細胞A549/DDP后對細胞功能的影響。
　　方法：利用實時熒光定量PCR方法檢測miRNA-181a在人正常胚肺細胞系HELF、人肺腺癌細胞系 A549、人肺腺癌耐藥細胞系 A549/DDP中的表達；利用pGenesil-miRNA-181a真核表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染A549/DDP細胞，同時設置未轉(zhuǎn)染組和空載組；實時熒光定量 PCR檢測 miRNA-181a轉(zhuǎn)染前后

2、的表達情況；MTT方法檢測miRNA-181a轉(zhuǎn)染前后對A549/DDP細胞活力和順鉑（DDP）作用下增殖抑制率的影響；流式細胞術檢測miRNA-181a轉(zhuǎn)染前后對A549/DDP細胞周期和順鉑作用下細胞凋亡率的影響；Tran swell方法檢測miRNA-181a轉(zhuǎn)染前后對A549/DDP細胞侵襲能力的影響；Western-blot方法檢測miRNA-181a轉(zhuǎn)染前后對A549/DDP細胞中靶基因Bcl-2和p53蛋白表達的影響。

3、r>　　結果：miRNA-181a在A549和A549/DDP中的表達量顯著低于HELF，（p?0.05），且在A549/DDP中表達量最低；miRNA-181a轉(zhuǎn)染A549/DDP細胞后表達顯著升高，（p?0.05）；miRNA-181a轉(zhuǎn)染A549/DDP后能夠抑制其細胞生長活力、細胞周期和細胞侵襲能力（p?0.05）；同時促進順鉑作用下A549/DDP細胞增殖抑制和細胞凋亡（p?0.05）；miRNA-181a轉(zhuǎn)染A549/DDP