miRNA-16對人肺腺癌A549細(xì)胞增殖和VEGF-A表達(dá)水平的影響.pdf

1、目的：
　　探討轉(zhuǎn)染miRNA-16后作用不同時間對體外培養(yǎng)的人肺腺癌A549細(xì)胞增殖的影響，以及對肺腺癌A549細(xì)胞內(nèi)VEGF-A表達(dá)水平的影響。
　　方法：
　　將研究對象（人肺腺癌A549細(xì)胞）分三組，分別是miRNA-16轉(zhuǎn)染組，陰性序列轉(zhuǎn)染組，空白對照組。將50nmol/L的miRNA-16 mimics和陰性對照序列用Lipofectamine2000轉(zhuǎn)染進(jìn)人肺腺癌A549細(xì)胞中（空白對照組除了沒有轉(zhuǎn)染的R

2、NA序列外，其他條件如所加的轉(zhuǎn)染混合液，實(shí)驗(yàn)對象等都與其他兩組一樣），通過qRT-PCR檢測轉(zhuǎn)染后A549細(xì)胞中miRNA-16的表達(dá)水平，通過四甲基偶氮唑藍(lán)法（MTT法）檢測轉(zhuǎn)染miRNA-16后不同時間點(diǎn)A549細(xì)胞的增殖抑制情況，通過ELSA法檢測轉(zhuǎn)染miRNA-16并培養(yǎng)24小時后A549細(xì)胞上清液VEGF-A表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　qRT-PCR：轉(zhuǎn)染培養(yǎng)24小時后，測得轉(zhuǎn)染組 miRNA-16表達(dá)水平明顯高于

3、空白對照組和陰性對照組（P<0.05），其中轉(zhuǎn)染組表達(dá)水平是空白組的467.59±35.47倍，空白對照組和陰性對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義；MTT法：轉(zhuǎn)染并培養(yǎng)后，轉(zhuǎn)染組細(xì)胞增殖抑制率明顯高于空白對照組和陰性對照組（P<0.05），在24小時，miRNA-16轉(zhuǎn)染組、陰性序列轉(zhuǎn)染組和空白對照組的OD值分別是0.471±0.028、0.561±0.020和0.567±0.025，在48小時，三組的OD值分別是0.543±0.021、0.678

4、±0.026和0.688±0.022，而在72小時，三組的OD值分別是0.623±0.016、0.895±0.019和0.907±0.018；陰性對照組和空白對照組比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；ELISA法：轉(zhuǎn)染并培養(yǎng)后，ELISA法測得轉(zhuǎn)染組細(xì)胞上清VEGF-A表達(dá)水平為55.56±6.04 pg/ml，較陰性對照組（152.07±6.41 pg/ml）和空白對照組（146.43±7.71 pg/ml）明顯降低（P<0.05），而陰性對照組和