茯苓總?cè)泼庖咭种萍罢T導(dǎo)人結(jié)腸癌RKO細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2013級(jí)碩士學(xué)位論文茯苓總?cè)泼庖咭种萍罢T導(dǎo)人結(jié)腸癌RKO細(xì)胞凋亡的研究StudyofimmunosuppressiveactivityandapoptosisinducingeffectoftotaltriterpenoidsfromPoriaCOCOSonhumancolorectalcarcinomaRK0cells課題來源：橫向合作項(xiàng)目學(xué)位申請(qǐng)人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)成員林

2、嘉雷林生教授藥理學(xué)學(xué)術(shù)型碩士研究生藥學(xué)院劉培慶教授徐江平教授葉春玲教授李曉娟教授劉利紅教授2016年5月23日廣州I摘要誘導(dǎo)小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子(IL一2，IFN—y)的影響以及茯苓總?cè)茖?duì)LPS誘導(dǎo)小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生抗體的影響。31茯苓總?cè)企w內(nèi)對(duì)小鼠免疫功能及大鼠免疫病理模型的影響：采用兔紅細(xì)胞免疫小鼠產(chǎn)生血清溶血素(IgM)，之后用分光光度法測定小鼠溶血素的變化。ELISA法測定其對(duì)血清IL4的影響。通過測定茯苓總?cè)茖?duì)小鼠遲發(fā)型超

3、敏反應(yīng)(DTH)所造成的耳廓腫脹度以及觀察給藥后胸腺及脾臟指數(shù)的變化來研究其對(duì)細(xì)胞免疫功能的影響。在大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎模型中，采集給藥后大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎模型關(guān)節(jié)炎指數(shù)、足趾腫脹度、體重等參數(shù)，評(píng)估其對(duì)自身免疫性疾病的治療作用。41茯苓總?cè)普T導(dǎo)人結(jié)腸癌RKO細(xì)胞凋亡的研究：首先將RKO細(xì)胞接種于96孔板，經(jīng)茯苓總?cè)铺幚砗?，MTT法檢測細(xì)胞的增殖活力；然后，接種RKO細(xì)胞于6孔板，茯苓總?cè)铺幚砗?，DAPI染色觀察細(xì)胞核形態(tài)學(xué)變化，JC一

4、1染色觀察細(xì)胞線粒體跨膜電位變化，Western印跡法檢測Bax、Bcl2、線粒體細(xì)胞色素C(CytC)的含量，酶促反應(yīng)顯色法檢測caspase9和caspase3的活性，評(píng)估其凋亡誘導(dǎo)作用及機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：111009茯苓粉末，經(jīng)提取分離，醇提物平均產(chǎn)量3239，乙酸乙酯提取物平均產(chǎn)量13969。平均產(chǎn)率分別為323％和127％。21除了低濃度茯苓總?cè)?1099／mL)對(duì)混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)的抑制效果不明顯外，10lag／mL以上濃度茯

5、苓總?cè)?20、40、8099／mL)均能顯著抑制混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)的增殖反應(yīng)(代謝活力)，與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且有濃度依賴趨勢。31ConA可以明顯促進(jìn)脾細(xì)胞的代謝活力，低濃度茯苓總?cè)?1099／mL)雖然有輕微抑制ConA誘導(dǎo)的小鼠脾細(xì)胞增殖反應(yīng)的趨勢，但與ConA組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而1099／mL以上濃度(20、40、8099／mL)均可以顯著抑制ConA誘導(dǎo)的小鼠脾細(xì)胞增殖反應(yīng)，且有濃度依賴趨勢。41流式細(xì)胞術(shù)檢