Nogo-A蛋白表達(dá)與少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤并發(fā)癲癇的相關(guān)性研究.pdf

1、第一部分不同病理分型膠質(zhì)瘤癲癇發(fā)病率
　　目的：了解并比較不同病理分型膠質(zhì)瘤癲癇發(fā)生率。方法：回顧性分析本科2013年至2015年近三年間收治的經(jīng)病理診斷明確的329例膠質(zhì)瘤病歷資料。結(jié)果：星形細(xì)胞瘤癲癇發(fā)生率為25.9％，其中低級(jí)別星形細(xì)胞瘤（WHOI-II級(jí)）癲癇發(fā)生率34.8%，高級(jí)別星形細(xì)胞瘤（WHOIII-IV級(jí)）癲癇發(fā)生率16.5%，少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤癲癇發(fā)生率39.2%，其中WHOII級(jí)癲癇發(fā)生率46.2%，WHOIII

2、級(jí)癲癇發(fā)生率16.7%，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤癲癇發(fā)生率16.7%，室管膜瘤癲癇發(fā)生率為0，節(jié)細(xì)胞瘤癲癇發(fā)生率為46.2%，混合型膠質(zhì)細(xì)胞瘤癲癇發(fā)生率為62.5%，其他類型膠質(zhì)瘤癲癇發(fā)生率為30%。因混合型膠質(zhì)瘤、節(jié)細(xì)胞瘤、顱內(nèi)室管膜瘤等病理分型的膠質(zhì)瘤病例數(shù)較少，未進(jìn)行進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。在少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤、星形細(xì)胞瘤、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中，少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤癲癇發(fā)生率（39.2%）最高，相較于星形細(xì)胞瘤（25.9%），差異不顯著（P＞0.05），相較于膠質(zhì)

3、母細(xì)胞瘤（16.7%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），星形細(xì)胞瘤癲癇發(fā)生率高于膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，但差異不顯著（P＞0.05）。發(fā)生在額顳部的WHOII級(jí)少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤癲癇發(fā)生率為58.8%，較相同部位的WHOII級(jí)星形細(xì)胞瘤癲癇發(fā)生率（34.5%）高，但差異不顯著（P＞0.05)。結(jié)論：少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤癲癇發(fā)生率在膠質(zhì)細(xì)胞瘤中處于較高水平。
　　第二部分 Nogo-A蛋白在少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤癲癇組與非癲癇組瘤組織中的表達(dá)
　　目的

4、：檢測(cè)并比較Nogo-A蛋白在少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤患者癲癇組與非癲癇組瘤組織中的表達(dá)情況。方法：將收集的23例少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤標(biāo)本分為癲癇組與非癲癇組，采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)標(biāo)本中Nogo-A蛋白的表達(dá)，對(duì)兩組標(biāo)本免疫組化圖片行免疫組化評(píng)分，比較兩組免疫組化評(píng)分；采用免疫印跡技術(shù)檢測(cè)標(biāo)本中Nogo-A蛋白的表達(dá)，應(yīng)用圖像分析軟件分析其灰度值，比較兩組Nogo-A/GAPDH比值。結(jié)果：少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤癲癇組Nogo-A蛋白表達(dá)免疫組化評(píng)分為（6

5、.79?2.00），高于非癲癇組（4.44?1.59），差異顯著(P<0.05)；免疫印跡實(shí)驗(yàn)顯示癲癇組Nogo-A/GAPDH（0.814?0.217）較非癲癇組Nogo-A/GAPDH（0.540?0.153）高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論：少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤癲癇組患者瘤組織中Nogo-A蛋白表達(dá)含量較非癲癇組顯著升高，該蛋白可能與少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤并發(fā)癲癇具有相關(guān)性。
　　第三部分 Nogo-A蛋白對(duì)新生大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)

6、胞內(nèi)鈣離子濃度的影響
　　目的：探索Nogo-A蛋白對(duì)新生大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的影響。方法：采用機(jī)械分離+酶消化法提取新生大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元，培養(yǎng)成功后鑒定神經(jīng)元，隨后將培養(yǎng)7天的原代神經(jīng)元按干預(yù)藥物不同分為對(duì)照組（Krebs-ringer液）、Nogo-A蛋白組、Nogo-A蛋白+尼莫地平組和尼莫地平組，分別給予上述藥物后，以Fluo4/AM標(biāo)記神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)鈣離子信號(hào)，采用激光共聚焦顯微鏡技術(shù)檢測(cè)各時(shí)間點(diǎn)各組神經(jīng)元胞內(nèi)鈣離

7、子信號(hào)強(qiáng)度，對(duì)最終數(shù)據(jù)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：加入藥物后，對(duì)照組和尼莫地平組神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)鈣離子信號(hào)強(qiáng)度在各時(shí)間點(diǎn)未見(jiàn)明顯變化（P>0.05），而Nogo-A組和Nogo-A+尼莫地平組鈣離子信號(hào)持續(xù)升高（P<0.05）。組間比較結(jié)果顯示，在1 min時(shí)，4組間的神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)鈣離子信號(hào)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；在3、5、10 min時(shí)，尼莫地平組神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)鈣離子信號(hào)與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而Nogo-A組和