反義寡核苷酸對(duì)培養(yǎng)的視神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞Nogo-A調(diào)控的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文反義寡核苷酸對(duì)培養(yǎng)的視神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞NogoA調(diào)控的實(shí)驗(yàn)研究姓名：彭錫嘉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：劉少章葉劍2002.5.1、f結(jié)果：1視神經(jīng)組織接種后3天，有圓形或梭形的細(xì)胞自視神經(jīng)遷出；11悉生右，細(xì)胞基本鋪滿蓋玻片；GC抗體免疫組化顯示獲得的細(xì)胞為少突膠質(zhì)細(xì)胞。2原位雜交顯示NogoAmRNA陽性表達(dá)的細(xì)胞胞漿呈棕黃色陽性反應(yīng)，陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)呈陰性反應(yīng)。3熒光倒置顯微鏡下觀察，80％以上的細(xì)胞

2、呈綠色熒光；RT—PCR結(jié)果顯示三種濃度(21tM、5uM、10pM)的NogoA反義寡核苷酸組，Nogo—AmRNA的表達(dá)均顯著降低(PO05)。10uM以下的濃度對(duì)存活無明顯影響。Y結(jié)論：本課題建立的少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)方法，可獲得純化的少突膠質(zhì)細(xì)胞，能滿足進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)需要；少突膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)NogoAmRNA；少突膠質(zhì)細(xì)胞能直接攝取反義寡核苷酸；NogoA反義寡核苷酸可有效地、特異性地抑制靶基因的表達(dá)。lOuM以下的濃度對(duì)存活無明顯影響