KIR單體分型在異基因造血干細(xì)胞移植中的作用.pdf

1、【目的和意義】探討供者KIR單體型、著絲粒端（Cen）/端粒端（Tel）基序?qū)o關(guān)供者造血干細(xì)胞移植預(yù)后的影響及在遴選供者中的作用；建立 KIR單體型分型的策略。
　　【方法】此項(xiàng)研究共分為兩個(gè)部分：⑴102個(gè)完整家系（包括父母雙方及子/女）及965個(gè)無關(guān)個(gè)體共計(jì)1271個(gè)樣本，采用聚合酶鏈反應(yīng)-序列特異性引物法（PCR-SSP）對(duì)所有樣本進(jìn)行17種已知KIR基因分型，通過遺傳規(guī)律區(qū)分來源于父方/母方的KIR單體型，并對(duì)所有家系和

2、無關(guān)個(gè)體進(jìn)行KIR基因型分析。⑵選擇在蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院接受無關(guān)供者造血干細(xì)胞移植的惡性血液病患者210例，其中AML98例、ALL62例、CML19例、MDS24例、NHL7例；采用第一部分研究中建立的KIR單體分型的方法，在無關(guān)供者HSCT中探討供-受者KIR基因相合/錯(cuò)配，iKIR-HLA相合/錯(cuò)配、供者KIR基因型、單體型、Cen端和Tel端基序?qū)σ浦差A(yù)后的影響。
　　【結(jié)果】⑴經(jīng)家系遺傳規(guī)律分析，在102個(gè)完整家系中共

3、發(fā)現(xiàn)1種A單體型及15種B單體型，其中頻率最高的B單體型被命名為B1、B2、B3，比例分別為10.05％、6.62%、4.90%；根據(jù)KIR單體型分析，53.92%的個(gè)體為AA型、35.29%的個(gè)體為AB型、10.78%的個(gè)體為BB型。在22例B單體型純合（BB型）的個(gè)體中，有8例（36.36%）根據(jù)基因型結(jié)果只能判斷為Bx型（無法區(qū)分AB型或BB型），而進(jìn)行KIR單體分型后可明確為BB型。A單體型與B1/B2/B3單體型組合在一起，構(gòu)

4、成了研究人群中出現(xiàn)比例最高的B組基因型，分別為Bx1/Bx2/Bx3，這三種基因型在家系個(gè)體中的出現(xiàn)頻率分別為13.72%、7.35%、4.41%，在無關(guān)個(gè)體中的出現(xiàn)頻率為15.86%、10.15%、5.80%。
　　基于KIR基因在單體型上的排列，在研究群體中共發(fā)現(xiàn)6種Cen端基序和7種Tel端基序，其中除了3種Cen端基序和2種Tel端基序已有文獻(xiàn)報(bào)道外，其余基序均為本研究人群中首次發(fā)現(xiàn)。cA01-tA01的組合構(gòu)成了最常見的

5、A單體型；而B組中cB02是最常見的Cen端基序，tB01是最常見的Tel端基序，cA01-tB01及cB02-tA01的組合分別構(gòu)成了最常見的B單體型。
　　KIR基因連鎖分析發(fā)現(xiàn)：2DL1/2DL3、2DS1/2DL5A、2DL2/2DS2、2DL5A/3DS1、2DS1/3DS1、2DL1/2DP1、2DL3/2DP1基因間存在正連鎖；而2DL5A/2DS4F、2DS1/2DS4F、2DS4F/2DS4D、2DS5/3DL1

6、、2DS4F/3DS1基因間存在負(fù)連鎖。（P<0.05）⑵對(duì)210例接受無關(guān)供者造血干細(xì)胞移植的惡性血液病患者進(jìn)行四年的隨訪并進(jìn)行多因素分析發(fā)現(xiàn)，供-受者KIR基因相合/錯(cuò)配、iKIR-HLA相合/錯(cuò)配、性別相合、ABO血型相合、HLA基因9/10或10/10相合對(duì)移植后OS、RFS、NRM均無影響（P>0.05）。
　　進(jìn)一步根據(jù)疾病類型分組發(fā)現(xiàn)：AML/MDS患者（n=122）選擇KIR基因分型為Bx型的無關(guān)供者，移植后OS(

7、HR:0.443;95% CI,0.216–0.909; P=0.026)和RFS(HR:0.430;95% CI:0.210–0.880; P=0.021)明顯提高，而TRM(HR,0.342;95% CI,0.142–0.824; P=0.017)則顯著降低，但在ALL/NHL和CML患者移植中則無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。將供者基因型分為Bx1組（Cen端為A/A，Tel端存在2DS5）、Bx2組（Cen端為A/A，Tel端存在2DS3）、Bx

8、3+Bx4組（Cen端為A/B）、其他Bx組后發(fā)現(xiàn)：對(duì)于移植時(shí)處于CR1期的AML/MDS患者（n=82），接受Bx1組供者（n=7）的移植，其移植后生存/無病生存低于選擇Bx2組和Bx3+Bx4組供者的移植（OS: P=0.024; RFS: P=0.021），也低于選擇其他Bx組供者(n=26)的移植（OS: P=0.019; RFS: P=0.024）。Bx1基因型對(duì)非CR1期的AML/MDS、ALL/NHL、和CML患者無明顯作

9、用。
　　同時(shí)，對(duì)于AML/MDS患者來說，選擇存在cen-B基序的供者，移植后OS(HR,0.397;95% CI,0.170–0.931; P=0.034)和RFS(HR,.395;95% CI,0.169–0.923; P=0.032)顯著提高，NRM(HR,0.273;95% CI,0.096–0.779; P=0.015)則明顯降低，并且cen-B基序的有利作用在HLA10/10相合組（n=89）和HLA9/10相合組（

10、n=33）間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。同樣，對(duì)CR1期的AML/MDS患者來說，供者存在Cen-B基序有利于改善移植后OS（HR=0.256;95% CI=0.084 to0.774; P=0.016）和RFS（HR=0.252;95% CI=0.084 to0.758; P=0.014）。但是，Cen-B的有利作用并不隨基序數(shù)目增加而迭加（cB/B vs. cA/B;OS: P=0.755; RFS: P=0.768）。Cen-B基序?qū)Ψ荂R1期