版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、目的和意義:造血干細胞移植(Hematopoietic Stem Cell Transplantation.HSCT)是目前治療惡性血液病的最有效方法之一,供者和患者人類白細胞抗原系統(tǒng)(Human Leukocyte Antigen,HLA)相合與否被認為是影響造血干細胞移植成敗的決定性因素。但是,即使是在HLA高分辨基因分型全相合的造血干細胞移植中,移植預(yù)后在受者間也存在著很大的差異。因此,近年來,除了HLA基因相合外,自然殺傷細胞(
2、Natural Killer,NK)受體系統(tǒng)日益受到關(guān)注。殺傷細胞免疫球蛋白樣受體(killer Ig-like receptor,KIR)是表達在NK細胞及部分T細胞表面的一類受體,在異基因造血干細胞移植中起著重要的作用。KIR基因的分布在不同人種不同個體間存在很大的差異,目前尚缺乏對中國漢族人群KIR基因分布規(guī)律的了解,因而,研究KIR基因遺傳學(xué)背景的差異對進一步探討其對疾病的影響具有重要意義。KIR基因有兩種單體型:單體型A和單體
3、型B。單體型A存在唯一的活化型受體基因2DS4,其中只有2DS4*001(包括2DS4*0010101、*0010102、*0010103、*00102、*00103)編碼NK細胞表面有功能的受體,其他等位基因(如2DS4*003、*004、*006、*007、*008、*009)在第5外顯子有22個堿基的缺失,導(dǎo)致移框突變使其所編碼的蛋白缺失了跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),從而無法錨定在細胞膜上,以功能尚不明確的游離蛋白的形式存在。但是,到目前為止
4、,國內(nèi)外尚無針對KIR2DS4基因與造血干細胞移植相關(guān)的研究。隨著對KIR受體識別和殺傷腫瘤細胞重要作用的不斷了解,人們逐漸認識到供者KIR與受者HLA遺傳背景影響了HSCT預(yù)后,由抑制型KIR(inhibitory KIR receptors,iKIR)-HLA“錯配模式”引起的NK細胞異源反應(yīng)性在HSCT中促進移植物植入以及增強移植物抗白血病效應(yīng)(graft-versus-leukemia,GVL)的作用,已經(jīng)成為國內(nèi)外學(xué)者研究的熱
5、點。同時,供者來源的活化型KIR受體(activating KIR receptors,aKIR)傳導(dǎo)的活化信號對NK細胞活性的調(diào)節(jié)可能起到在臨床治療中如何控制移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)和調(diào)節(jié)移植物抗白血病效應(yīng)的作用。
方法:研究對象為150例中國漢族人,75對接受異基因造血干細胞移植的供者及受者,患者白血病分型為ALL29例、CML24例、AML19例、其他惡性血液病3
6、例。
此項研究共分為三部分:(1)采用基因測序(Sequence-based typing,SBT)對HLA-A,-B,-C,-DRB1和-DQB1位點進行高分辨分型;采用序列特異性引物聚合酶鏈反應(yīng)(PCR-sequence-specific primers PCR-SSP)進行KIR基因分型,研究了KIR基因以及KIR單體型在中國漢族人群中的分布情況以及與其他人種進行了比較,并且在此基礎(chǔ)上分析了供者KIR和受者HLA的配
7、受體關(guān)系。(2)建立了SBT結(jié)合TOPO TA克隆的方法對2DS4等位基因進行全長測序,證實了2DS4完整型與缺失型等位基因的存在,研究KIR2DS4等位基因在中國人群中的分布,分析了中國人群KIR2DS4等位基因的分布特點并發(fā)現(xiàn)了三個新等位基因。(3)建立了供者KIR-受者HLA的配受體模式,分析了“缺失配體”模式對異基因HSCT預(yù)后的影響;采用實時定量PCR(Real-time PCR),對30例存在“缺失配體”的移植動態(tài)隨訪了受者
8、體內(nèi)KIR2DL1、2DS1、3DL1和3DS1基因在移植后的mRNA表達;并結(jié)合臨床資料,分析KIR單體型對移植預(yù)后的影響,同時進一步分析了其中35例供者為KIR單體型A純合的移植中供者來源2DS4等位基因與移植后急性GVHD發(fā)生的關(guān)系,并且從轉(zhuǎn)錄水平研究了KIR2DL1/3DL1基因與異基因HSCT預(yù)后的相關(guān)性。
結(jié)果:(1)17種KIR基因均能夠被檢測出,比例從21.3%至100%不等,所有樣本都存在框架基因3DL3
9、、3DP1、2DL4和3DL2,除框架基因以外,2DL1和2DP1是在中國漢族人群中分布最廣的基因,而比例最低的是2DL2和2DS3;44.0%的個體KIR分型為A/A,56.0%的個體KIR分型為B/x。KIR基因與KIR單體型在中國漢族人群中的分布比例與日本人群相似,而與高加索人群和非洲裔美國人群存在較大差異。(2)分析供者抑制型KIR受體與受者HLA配體分子,75例移植中有53例供者存在KIR2DL1基因而受者沒有HLA-C2組位
10、點;2例供者存在KIR2DL12/L3基因而受者沒有HLA-C1組位點;24例供者存在KIR3DL1基因而受者沒有HLA-Bw4位點。(3)中國漢族人群在KIR基因及2DS4等位基因分布上具有其獨特性。150例樣本中139例(92.7%)存在KIR2DS4基因,對2DS4基因全長測序后發(fā)現(xiàn)4個2DS4等位基因:KIR2DS4*00101、*003、*004和*007;78.4%(109/139)的個體存在2DS4*00101;2DS4缺
11、失型(個體存在1個或缺失2DS4*00101基因)與完整型(個體存在兩個2DS4*00101基因)的存在比率為1:2。在150例個體中,66例KIR分型為A/A,84例KIR分型為B/x型。在A/A組中,42.4%(28/66)的個體為完整型/缺失型2DS4雜合,明顯高于B/x組(9.5%,8/84);12.1%(8/66)的個體為缺失型2DS4純合,這個比例在B/x組中為26.2%(22/84)。發(fā)現(xiàn)了3個KIR2DS4新基因。(4)
12、研究KIR基因?qū)?5例進行HSCT預(yù)后的影響,60例移植供受者均為HLA-A、B、C、DRB1、DQB1位點高分辨全相合,15例有單個HLA-C等位基因分型不相合。存在“缺失配體”模式的移植在A/A組和B/x組中所占的比例分別為88.6%和87.5%。采用多因素分析研究“缺失配體”模式移植的比例對移植預(yù)后的影響沒有發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)差異。75例移植中,當(dāng)供者KIR分型為B/x(n=40)時,移植后總體生存率(Overall survival,O
13、S)要明顯高于供者為A/A組(n=35)(RR3.1[95% CI1.1-8.6],P=0.007)。在其中35例供者為KIR單體型A/A純合的移植中,當(dāng)供者2DS4等位基因為完整型(n=14)時,移植后急性GVHD的發(fā)生率要明顯高于供者2DS4等位基因為缺失型(n=21)的情況(RR9.0[95% CI1.2-66.9],P=0.010),其中以Ⅲ-Ⅳ度aGVHD尤為明顯(P=0.006)。Real-time PCR動態(tài)隨訪患者移植后
14、2DL1、2DS1、3DL1和3DS1基因mRNA表達水平發(fā)現(xiàn):發(fā)生aGVHD的患者組在移植后30-90天,2DL1和3DL1和的mRNA拷貝數(shù)相比無aGVHD組明顯升高(P值分別為0.021和0.005);當(dāng)供者與受者均為KIR單體型A純合時,這一差異更為顯著:在發(fā)生aGVHD的患者組與不發(fā)生aGVHD的患者組之間,比較移植后90天時KIR2DL1和3DL1基因的mRNA表達水平,具有統(tǒng)計學(xué)上的差異(z=2.558,P=0.011)。
15、結(jié)果提示,移植早期(<90天)KIR2DL1和3DL1基因的mRNA高表達與aGVHD的發(fā)生呈正相關(guān)。
結(jié)論:中國漢族人群在KIR基因及2DS4等位基因分布上具有獨特性;供者為KIR單體型(B/x)的移植預(yù)后較好;供者來源完整型2DS4等位基因以及患者移植早期2DL1和3DL1基因mRNA高表達增加了移植后aGVHD的發(fā)生風(fēng)險。因此,移植前在HLA分型的基礎(chǔ)上結(jié)合KIR基因分型和KIR2DS4等位基因分型,可能對臨床上選擇
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- KIR單體分型在異基因造血干細胞移植中的作用.pdf
- 樹突狀細胞在異基因造血干細胞移植中的作用研究.pdf
- KIR3DL1基因在無關(guān)供者HLA全相合異基因造血干細胞移植中的表達及臨床意義.pdf
- 移植物中各種細胞成分及數(shù)量在異基因造血干細胞移植中的作用
- KIR-HLA基因及受配體模式在造血干細胞移植中的作用.pdf
- KIR基因型對異基因造血干細胞移植結(jié)果的影響及其機理研究.pdf
- 細胞因子基因多態(tài)性在異基因造血干細胞移植中的作用研究.pdf
- T輔助細胞轉(zhuǎn)錄因子在異基因造血干細胞移植中的作用.pdf
- KIR基因?qū)Ξ惢蛟煅杉毎浦差A(yù)后的影響及其機制研究的初步探討.pdf
- 硼替佐米在異基因造血干細胞移植中作用的初步研究.pdf
- 臍血間充質(zhì)干細胞在異基因造血干細胞移植中的應(yīng)用.pdf
- KIR基因分型在同胞HLA全相合造血干細胞移植中的意義.pdf
- 漢族人群中醛固酮瘤患者基因突變的研究.pdf
- 他克莫司在異基因造血干細胞移植中的臨床應(yīng)用.pdf
- 微衛(wèi)星標(biāo)志物在異基因造血干細胞移植中的應(yīng)用.pdf
- 漢族人MBL全長基因在CHO細胞中的表達.pdf
- 間充質(zhì)干細胞在兒童異基因造血干細胞移植中的應(yīng)用研究.pdf
- 自然殺傷T細胞在異基因造血干細胞移植aGVHD中的免疫調(diào)控研究.pdf
- HLA單倍體分型和抗HLA抗體在異基因造血干細胞移植中的作用.pdf
- 異基因造血干細胞移植術(shù)后感染的臨床研究.pdf
評論
0/150
提交評論