BRG1在DNA損傷修復(fù)中的作用研究.pdf

1、染色質(zhì)高度緊密的折疊阻止了轉(zhuǎn)錄因子和輔因子與DNA的結(jié)合,因而通過染色質(zhì)重塑以解除這樣的抑制環(huán)境,對(duì)于轉(zhuǎn)錄活動(dòng)的正常進(jìn)行是至關(guān)重要的。目前,染色質(zhì)重塑至少是通過兩種機(jī)制來完成的,一是通過依賴于ATP的染色質(zhì)改構(gòu)復(fù)合物,另一是通過組蛋白修飾酶復(fù)合物。前者的典型代表是SWI／SNF復(fù)合物,人類以BRG1或BRM作為其ATP酶催化亞基,BRG1在基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控、復(fù)制、重組等方面起著重要的作用,但該亞基在DNA損傷修復(fù)中所起的作用還不是很清楚。

2、
　　 DNA分子是生命體的遺傳物質(zhì)基礎(chǔ),細(xì)胞內(nèi)的DNA分子因物理、化學(xué)等多種因素的作用,有可能導(dǎo)致多種類型的損傷。當(dāng)DNA受到紫外線照射時(shí),主要產(chǎn)生環(huán)丁烷一嘧啶酮二聚體(CPD)和嘧啶6—4嘧啶酮光產(chǎn)物(6—4PP)。對(duì)于UV照射引起的DNA損傷主要是通過核酸切除修復(fù)途徑進(jìn)行修復(fù)的。
　　 本文主要討論了在UV照射引起的DNA損傷條件下,BRG1與DNA損傷修復(fù)的關(guān)系。首先建立UV照射引起的DNA損傷模型,即通過不同劑

3、量的UV照射,并采用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)細(xì)胞凋亡程度進(jìn)行檢測,用以摸索適合的UV劑量從而建立該模型。在該模型的基礎(chǔ)上,通過在SW13細(xì)胞中瞬時(shí)轉(zhuǎn)染BRG1表達(dá)質(zhì)粒及空載pBJ5質(zhì)粒(對(duì)照組),經(jīng)過30J／m2的UV照射后,分別以0h、6h、24h為修復(fù)時(shí)間進(jìn)行細(xì)胞損傷后修復(fù),最后對(duì)細(xì)胞早期凋亡程度進(jìn)行檢測。經(jīng)過統(tǒng)計(jì)分析,結(jié)果表明,轉(zhuǎn)染了BRG1表達(dá)質(zhì)粒的細(xì)胞的早期凋亡程度明顯較對(duì)照組的程度低,尤其是經(jīng)過24h的修復(fù)后,說明BRG1的參與促進(jìn)了D