電針對胰島素抵抗模型大鼠肝臟AMPK、ACC的干預機制研究.pdf

1、目的:
　　以高脂飲食誘導胰島素抵抗模型大鼠為研究對象，以噻唑烷二酮類藥物吡格列酮為對照，系統(tǒng)觀察針刺對胰島素抵抗大鼠血清脂聯(lián)素、游離脂肪酸含量的影響，肝臟AMPK、ACC蛋白表達的影響，以及肝臟超微結構形態(tài)學的改變，從而多層次、多水平詮釋針刺對胰島素抵抗脂質代謝紊亂的調節(jié)效應，為其強化胰島敏感功能提供新的理論基礎。
　　方法:
　　將52只雄性SPF級SD大鼠(180-220g)普通飼料適應性飼養(yǎng)5天，隨機抽出10只

2、為正常組，喂以普通飼料;余下大鼠改用高脂飼料喂養(yǎng)3個月為造模組。從第8周開始，每隔一周對所有大鼠進行眼眶靜脈竇取血，檢測空腹血糖(FPG)、血漿胰島素(FINS)，并計算胰島素敏感指標(ISI、HOMA-IR)，當模型組大鼠ISI比空白組明顯降低（P＜0.05），HOMA-IR明顯升高（P＜0.05）時，即進行高胰島素正葡萄糖鉗夾試驗，當葡萄糖輸注率(GIR)與空白組相比明顯降低（P＜0.05)時為造模成功。第12周造模成功后，采用分層

3、隨機法分為3組:模型組（11只）、西藥組（13只）、電針組（12只）?？瞻捉M繼續(xù)以普通飼料飼養(yǎng)2周，模型組繼續(xù)以高脂飼料飼養(yǎng)2周。電針組繼續(xù)以高脂飼料飼養(yǎng)2周，同時給予電針治療，穴取“豐隆”、“三陰交”，1次/日。西藥組續(xù)以高脂飼料飼養(yǎng)2周，同時給予吡格列酮懸濁液10mg/kg灌胃，1次/日。各組大鼠于治療結束后眼眶靜脈竇采血檢測FINS、ADP、FFA等指標，F(xiàn)PG測定采用葡萄糖氧化酶法，F(xiàn)INS、ADP、FFA測定采用ELISA法。

4、取肝臟，使用蛋白印跡檢測手段，觀察針刺前后胰島素抵抗模型大鼠肝臟AMPK、ACC蛋白表達情況。使用透射電鏡觀察針刺后胰島素抵抗模型大鼠肝臟組織超微結構形態(tài)學的改變。
　　結果:
　　1.高脂飼料飼養(yǎng)12周后，模型組、西藥組、電針組大鼠的GIR均較空白組顯著降低（P＜0.01)，表明造模成功。經過2周治療后，西藥組、電針組的GIR較模型組顯著升高（P＜0.01）。
　　2.透射電鏡觀察:空白組干細胞中細胞器結構完好，線粒

5、體、粗面內質網豐富，胞漿內無脂滴及脫顆?，F(xiàn)象，線粒體膜、嵴結構完整，排列規(guī)則，粗面內質網排列整齊;模型組肝細胞內可見大量脂滴分布，線粒體呈現(xiàn)不同程度腫脹，線粒體嵴變少變短，甚至出現(xiàn)空泡化。通過治療，西藥組、電針組肝細胞胞漿中脂滴較模型組減少，線粒體腫脹減輕，內外膜部分融合。
　　3.模型組血清中ADP較空白組顯著性降低（P＜0.01)，F(xiàn)FA較空白組顯著性升高（P＜0.01)。經治療后，西藥組、電針組的ADP較模型組顯著性升高（P

6、＜0.01，P＜0.05)，F(xiàn)FA較模型組顯著性降低（P＜0.01，P＜0.05)。
　　4.模型組大鼠肝臟的AMPK蛋白水平較空白組顯著降低（P＜0.01)，ACC蛋白水平顯著性升高（P＜0.05）。經治療后，西藥組、電針組AMPK蛋白水平較模型組顯著升高（P＜0.01，P＜0.05);西藥組、電針組ACC蛋白水平較模型組顯著降低（P＜0.01)。
　　結論:
　　研究表明，電針可通過激活脂聯(lián)素介導的信號通路，上調A