海南百歲老人中線粒體基因突變與女性長壽關聯(lián)性研究.pdf

1、目的:研究指出在長壽老人中普遍保持能量代謝功能，提示線粒體是細胞/組織產(chǎn)生能量的重要器官，并且在人類長壽中有重要作用。有研究指出線粒體基因突變通過降低電子傳遞鏈的功能，減少自由基的生成，產(chǎn)生有益于長壽表型的作用。本研究以線粒體基因組為主要研究對象，使用第二代高通量測序技術(NGS)對17個來自海南萬寧縣的百歲老人的線粒體基因組進行測序，分析mtDNA突變與個體壽命之間的關系，為進一步探討長壽基因與信號傳導通路變化提供依據(jù)。
　　方

2、法:本研究中，我們通過評估長壽組和年輕組的線粒體DNA測序結果，對比兩組總SNP頻率，個體SNP頻率，SNPs產(chǎn)生效應，在特定mtDNA區(qū)域SNP累積。將變異結果用Burrows-Wheeler Aligner(BWA)比對到線粒體基因組上;用GATK軟件對SNP和InDel進行變異檢測，用ANNOVAR軟件同時關聯(lián)多個數(shù)據(jù)庫（如dbSNP，1000g，ESP6500等）對變異結果進行注釋。
　　結果:1:選取海南地區(qū)，年齡在10

3、0歲以上（100±2歲）的女性老人17人。17例百歲老人中文盲17例(100.0％)，農(nóng)林牧漁勞動者13例(76.5％)，婚姻狀況喪偶15例(88.2％)，吸煙17例（100.0％，其中1例已戒煙），飲酒0例，飲茶5例(29.4％)，大便1次/1～2d17例(100.0％);有親屬年齡＞85歲2例(11.7％)，親屬年齡無＞85歲11例(64.7％)，無法考證4例(23.5％);無重要疾?。ㄐ姆文X（老年癡呆））17例(100％);老年性

4、耳聾0例(0％)。
　　2:所有mtDNA測序數(shù)據(jù)和rCRS對比。線粒體總長16596bp，在794個位點上總共發(fā)生355個不同的單堿基突變SNV。檢測到的突變類型大多數(shù)是轉換（93.1％的實驗組和81.7％的對照組），而顛換、插入和缺失相對較少。
　　3:調查SNP分布顯示不同。
　　4:在實驗組內發(fā)現(xiàn)11個突變位點，所有的實驗樣本在這些位點上都發(fā)生突變;
　　5:在實驗組內發(fā)現(xiàn)9個突變基因，所有的實驗樣本在這

5、些基因上都發(fā)生突變;
　　6:D-loop突變型在實驗組內的頻率顯著高于對照組(P=0.021);移碼突變在對照組內的頻率顯著高于實驗組(P=0.0000);
　　7:線粒體完整性未發(fā)現(xiàn)異常;
　　8:發(fā)現(xiàn)了3個mtSNPs(m.310T＞C或T＞TC，m.3105AC＞A，m.4048G＞A)與長壽關聯(lián)，其中非同義突變m.4048G＞A(Asp248Asn)在功能上可能起重要的保護作用。
　　9:發(fā)現(xiàn)4個基因或