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文檔簡介
1、蘋果多酚是蘋果中具有重要生理功效的一類物質(zhì)。本研究選用溶劑和超聲波輔助溶劑提取法,提取蘋果榨汁后剩余果渣中的多酚。通過單因素,確定工藝條件,通過響應面法對工藝條件進行優(yōu)化,通過驗證確定較優(yōu)工藝參數(shù)。應用光譜學方法(熒光光譜法、紫外-可見吸收光譜法、紅外光譜法以及圓二色譜法)研究蘋果多酚中的主要功能成分—根皮苷與牛血清白蛋白之間的主要作用力類型、結(jié)合方式等相互作用,探討多酚類物質(zhì)在體內(nèi)的代謝、轉(zhuǎn)運機制。利用 Langendorff技術,研
2、究蘋果多酚對大鼠離體心臟缺血再灌注損傷的保護作用,為蘋果多酚的資源利用拓展新思路,也為蘋果多酚功能食品或心臟保護類藥物的開發(fā)提供理論參考。本研究所述內(nèi)容如下:
1.第一章,綜述了蘋果多酚的分類、提取純化方法及其主要生理功效;根皮苷與牛血清白蛋白相互作用的機制;詳述了多酚對心臟的保護作用及心肌缺血再灌注近些年來的研究進展。
2.第二章,通過溶劑和超聲波輔助溶劑提取法,初步提取蘋果渣中的多酚類物質(zhì),并通過福林酚法(FC法
3、)定量多酚含量。溶劑提取法較優(yōu)工藝參數(shù)組合為:乙醇濃度:62.13%,溫度:80.53℃,時間:60.45 min,液料比(mL:g):50.6:2.5,該條件理論值為0.91 mg/g,實測值為0.90 mg/g。超聲波輔助溶劑提取法較優(yōu)工藝參數(shù)組合為:液料比(mL:g):77.99:2.5,乙醇濃度:35.38%,超聲功率:40.54%(263.51 W),提取時間:18.99 min,該條件理論值為1.59 mg/g,實測值為1.
4、60 mg/g。從提取效果角度考慮超聲波輔助溶劑提取法顯著優(yōu)于溶劑法。對超聲波輔助溶劑提取法提取的蘋果多酚,經(jīng)純化后,用高效液相色譜進行檢測,結(jié)果表明,蘋果多酚的主要成分為(+)-兒茶素、原花青素B2、綠原酸、咖啡酸、根皮苷和槲皮素等。
3.第三章,選取蘋果多酚中的主要功能成分之一根皮苷為代表,采用光譜學方法研究其與牛血清白蛋白的作用機制。熱力學研究結(jié)果顯示,根皮苷與牛血清白蛋白之間發(fā)生了結(jié)合反應,形成復合物,兩分子結(jié)合距離為
5、3.034 nm;牛血清白蛋白的熒光性發(fā)生靜態(tài)猝滅,兩者之間的作用力類型為靜電引力。根皮苷主要結(jié)合到牛血清白蛋白的siteⅠ位點。多光譜實驗數(shù)據(jù)表明,牛血清白蛋白與根皮苷作用后,蛋白構象發(fā)生改變。
4.第四章,利用 Langendorff技術探究蘋果多酚對大鼠離體心臟缺血再灌注損傷的保護作用。實驗數(shù)據(jù)表明,在一定濃度范圍內(nèi),蘋果多酚能夠降低心肌缺血再灌注的損傷程度,與其降低氧化應激損傷程度有關。不同濃度蘋果多酚劑量組之間的對比
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