人尿激肽原酶對(duì)大鼠急性缺血性卒中后血管新生作用的研究.pdf

1、腦卒中已經(jīng)在全球范圍內(nèi)成為導(dǎo)致死亡以及長(zhǎng)期殘疾的首要病因之一，因而尋找并發(fā)展新型有效的治療缺血性卒中的方法顯得至關(guān)重要。近年來，多項(xiàng)研究顯示缺血性卒中發(fā)生后病灶部位的血管新生不僅能夠提高局部的血供，同時(shí)也促進(jìn)內(nèi)源性的神經(jīng)再生并且有助于卒中后的神經(jīng)功能恢復(fù)，因此，血管新生已經(jīng)成為缺血性卒中治療的研究熱點(diǎn)。人尿激肽原酶（即注射用尤瑞克林），作為國(guó)內(nèi)近年來開發(fā)的Ⅰ類新藥，臨床試驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)其能夠減少急性缺血性卒中患者的神經(jīng)功能損傷，并提高遠(yuǎn)期預(yù)

2、后;但關(guān)于人尿激肽原酶是否能夠促進(jìn)病灶部位的血管新生，目前的研究還比較少。68Ga-PRGD2 PET/CT作為一項(xiàng)能夠特異性識(shí)別新生血管表面的整合素αvβ3受體、從而評(píng)估機(jī)體血管新生狀況的無創(chuàng)的分子靶向顯影技術(shù)，是目前新生血管顯像研究的重要內(nèi)容，并已在腫瘤、心肌梗死等疾病中得到應(yīng)用，但將其應(yīng)用于評(píng)估卒中后缺血灶血管新生的研究尚且較少。
　　目的:1、評(píng)估68Ga-PRGD2 PET顯影技術(shù)應(yīng)用于大鼠大腦中動(dòng)脈卒中(MCAO)模型

3、中檢測(cè)血管新生狀況的可行性;
　　2、結(jié)合分子影像學(xué)及生物學(xué)指標(biāo)綜合評(píng)估人尿激肽原酶（注射用尤瑞克林）對(duì)大鼠MCAO模型是否具有血管新生作用。
　　方法:通過線栓法建立SD大鼠大腦中動(dòng)脈卒中(MCAO)模型，將建模成功的大鼠分為①尤瑞克林給藥組:通過靜脈注射3.5×10-3PNA/(kg·d)，療程分為7天和14天;②對(duì)照組:通過腹腔注射等量生理鹽水，療程同樣分為7天和14天。另選擇健康SD大鼠組成假手術(shù)組，通過腹腔注射等量

4、生理鹽水，療程分為7天和14天。對(duì)尤瑞克林給藥組和對(duì)照組大鼠進(jìn)行以下方面的評(píng)價(jià):①建模后第1、3、7、14天行Longa評(píng)分評(píng)估神經(jīng)功能恢復(fù)情況;②在建模后第7、14天分別完成18F-FDGMicroPET和68Ga-PRGD2 MicroPET檢查;③在建模后第7、14天分別取給藥組、對(duì)照組大鼠患側(cè)大腦皮層病灶周邊組織通過Western Blot法檢測(cè)整合素β3水平;④在建模后第7天、14天分別取給藥組、對(duì)照組和假手術(shù)組大鼠右側(cè)大腦皮

5、層病灶周邊組織通過ELISA法檢測(cè)VEGF-A水平。
　　結(jié)果:1、建模后第1、3、7天給藥組及對(duì)照組大鼠Longa評(píng)分均無顯著性差異，建模后第14天給藥組Longa評(píng)分較對(duì)照14天組降低，提示給藥組可能有神經(jīng)功能恢復(fù)更好的趨勢(shì)，但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.06);
　　2、18F-FDG MicroPET顯像提示給藥和對(duì)照7天組大鼠患側(cè)大腦均可見代謝明顯減低區(qū)，兩組間放射性攝取無顯著性差異(P＞0.05)，給藥14天組

6、大鼠放射性攝取比對(duì)照14天組有升高的趨勢(shì)，但兩組間無顯著性差異(P=0.051)，給藥14天組與7天組相比放射性攝取無顯著性差異(P＞0.05);
　　3、68Ga-PRGD2 MicroPET顯像提示給藥7天組、給藥14天組大鼠梗死區(qū)放射性攝取均較對(duì)照7天組、對(duì)照14天組升高(P＜0.05)，給藥14天組攝取值與給藥7天組相比無顯著性差異(P＞0.05);
　　4、 Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示給藥7天組患側(cè)腦組織

7、整合素β3水平高于對(duì)照7天組(P＜0.05)，給藥14天組與對(duì)照14天組整合素β3水平無顯著性差異(P＞0.05);
　　5、ELISA檢測(cè)顯示給藥7天及14天組大鼠腦組織VEGF-A水平均高于對(duì)照7天及14天組(P＜0.05)，給藥14天組大鼠腦組織VEGF-A水平較給藥7天組無顯著性差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:1、人尿激肽原酶（注射用尤瑞克林）對(duì)MCAO大鼠具有促進(jìn)血管新生的作用，并可能對(duì)改善急性缺血性卒中后的神經(jīng)