細(xì)胞周期蛋白Ⅰ(Cyclin Ⅰ)促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞產(chǎn)生順鉑耐藥性的相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、目的:順鉑（順氯氨鉑Ⅱ，amminedichloroplatinumⅡ，CDDP）是目前一線化療藥物中最有效的藥物之一，廣泛應(yīng)用于多種惡性腫瘤，尤其是宮頸癌(CervicalCancer，CC)的治療。但我們發(fā)現(xiàn)在治療過(guò)程中癌細(xì)胞會(huì)逐漸對(duì)順鉑產(chǎn)生不同程度的耐藥，后期的化療效果差強(qiáng)人意。本研究的目的是分析探討宮頸癌細(xì)胞對(duì)抗順鉑的相關(guān)機(jī)制，通過(guò)分析細(xì)胞周期蛋白Ⅰ(CyclinⅠ)的下游蛋白及其本身表達(dá)改變后，宮頸癌細(xì)胞耐藥程度的改變，探討細(xì)

2、胞周期蛋白Ⅰ在順鉑耐藥具體過(guò)程中發(fā)揮的作用，為下一步探討抑制宮頸癌細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性打下一定基礎(chǔ)。
　　方法:本研究按照年齡和臨床分期、病理分期，選取了30例宮頸癌病人的腫瘤組織標(biāo)本入組。采用實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)技術(shù)分析腫瘤細(xì)胞中細(xì)胞周期蛋白Ⅰ的表達(dá)，應(yīng)用蛋白印跡試驗(yàn)(Western Blot，WB)檢測(cè)下游蛋白質(zhì)分子的表達(dá)變化。應(yīng)用細(xì)胞增殖試驗(yàn)及異種移植試驗(yàn)檢測(cè)順鉑對(duì)宮頸癌細(xì)胞的毒性變化。慢病毒介導(dǎo)的基因高表達(dá)和s

3、iRNA介導(dǎo)的基因水平下調(diào)被用來(lái)觀察細(xì)胞周期蛋白Ⅰ在宮頸癌耐藥過(guò)程中的作用。
　　結(jié)果:腫瘤細(xì)胞中細(xì)胞周期蛋白Ⅰ的濃度與順鉑耐藥正相關(guān)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，化療期間對(duì)順鉑產(chǎn)生耐藥的宮頸癌病人中，細(xì)胞周期蛋白Ⅰ存在高表達(dá)。穩(wěn)定高表達(dá)的細(xì)胞周期蛋白Ⅰ使HeLa細(xì)胞對(duì)更高濃度的順鉑也產(chǎn)生了抵抗。同時(shí)，體外實(shí)驗(yàn)證明上調(diào)細(xì)胞周期蛋白Ⅰ水平能夠明顯增加體外腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)速率，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明上調(diào)細(xì)胞周期蛋白Ⅰ水平能夠增加體內(nèi)腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性。

4、>　　通過(guò)對(duì)CyclinⅠ下游分子的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞周期蛋白Ⅰ促進(jìn)了細(xì)胞周期蛋白依賴性蛋白激酶5(Cdk-5)的高表達(dá)，而Cdk-5通過(guò)阻止宮頸癌細(xì)胞系的凋亡達(dá)到促進(jìn)順鉑耐藥的作用。與此相一致，在細(xì)胞周期蛋白Ⅰ高表達(dá)的Hella細(xì)胞系中，通過(guò)siRNA(Small interfering RNA)的作用減少Cdk5蛋白表達(dá)，可以增加腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性。
　　結(jié)論:細(xì)胞周期蛋白Ⅰ及其下游蛋白質(zhì)Cdk5與宮頸癌細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性有關(guān)