集胞藻PCC6803基因slr0280調控機制的研究.pdf

1、隨著分子生物學和分子遺傳學研究的發(fā)展，特別是重組DNA技術的廣泛應用，藍藻分子遺傳學取得了許多成就。其中集胞藻（Synechocystis sp.）PCC6803是一種具有天然DNA轉化系統(tǒng)的單細胞藍藻，它既能利用光能進行自養(yǎng)生長，也能利用葡萄糖進行異養(yǎng)生長，是光合作用分子生物學研究的重要模式之一。
　　 在本研究中，PCR擴增了藍細菌集胞藻6803（Synechocystis sp. PCC6803）中功能未知的基因slr02

2、80，進一步以pBluescript SK(+)為載體將其克隆到大腸桿菌中，構建了pBlue-0280質粒。再通過DNA體外重組，以卡那霉素抗性基因完全取代slr0280基因片段，構建了攜帶選擇性標記的卡那霉素抗性的pBlue-0280-kana質粒。該質粒轉化野生型集胞藻6803細胞，獲得了能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上正常生長的slr0280基因缺失突變株。對該突變株基因組DNA進行PCR擴增，驗證其基因結構的正確性。
　　 從生

3、理曲線，藻膽蛋白、葉綠素a的含量和光合放氧速率及光照強度，外源葡萄糖，鹽濃度梯度對藻的生長的影響，常溫光譜及低溫熒光光譜等幾個方面對突變株進行了探究。突變株細胞生長速度較野生型細胞慢，胞內的葉綠素及藻膽蛋白的含量比野生型偏低，表明該突變株的光合效率有所下降。在有外源葡萄糖存在的條件下，突變株生長狀況比野生型的好，說明此突變株比較適合混養(yǎng)生長。低溫熒光光譜顯示，slr0280基因的缺失，并未對光合作用過程能量的傳遞造成很大影響，其功能有待