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1、集胞藻集胞藻PCC6803中反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白中反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白Slr1909對(duì)酸耐受的調(diào)控機(jī)對(duì)酸耐受的調(diào)控機(jī)制的研究的研究RegulationofacidtolerancebyaresponseregulatSlr1909inSynechocystissp.PCC6803學(xué)科專業(yè):制藥工程研究生:任薔指導(dǎo)教師:張衛(wèi)文教授天津大學(xué)化工學(xué)院學(xué)院二零一四年六月摘要藍(lán)細(xì)菌在碳循環(huán)中起重要作用,而低pH是藍(lán)細(xì)菌常見(jiàn)的環(huán)境脅迫之一。目前,盡管已有少數(shù)文獻(xiàn)報(bào)
2、道藍(lán)細(xì)菌對(duì)酸性脅迫的分子機(jī)制,但是與酸脅迫相關(guān)的調(diào)節(jié)機(jī)制還遠(yuǎn)未完全闡述。本研究用同源雙交換技術(shù)構(gòu)建了44株缺失反應(yīng)調(diào)節(jié)因子的基因缺失突變株,通過(guò)篩選各突變株在酸脅迫下的生長(zhǎng)狀況,發(fā)現(xiàn)△slr1909在pH6.16.5條件下,與野生株相比生長(zhǎng)速率變慢。綜合使用iTRAQ聯(lián)合LCMSMS蛋白組學(xué)方法、GCMS代謝組學(xué)方法和實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法,我們初步構(gòu)建了反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白Slr1909的酸性應(yīng)答調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。結(jié)果顯示,由Slr1909調(diào)控的信號(hào)
3、轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑與之前報(bào)道的SphSSphR調(diào)節(jié)途徑可能是相互獨(dú)立的,因?yàn)樗崦{迫下,SphSSphR調(diào)節(jié)途徑中差異表達(dá)的蛋白在突變株?slr1909中并未出現(xiàn)差異表達(dá)現(xiàn)象。蛋白組學(xué)分析表明,經(jīng)過(guò)酸處理的突變株與野生株相比,有24個(gè)表達(dá)量上調(diào)的蛋白和10個(gè)表達(dá)量下調(diào)的蛋白。值得指出的是,三個(gè)蛋白質(zhì),Slr1259,Slr1260和Slr1261其編碼基因似乎位于一個(gè)操縱子上,在slr1909基因被敲除后,表達(dá)量均下調(diào),說(shuō)明這些蛋白在酸性環(huán)境下行使
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