神經(jīng)元活動依賴的GluN2a-NMDA受體膜運輸機制的研究.pdf

1、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中一類重要的離子型谷氨酸能受體，在與學習記憶能力高度相關(guān)的中樞神經(jīng)信號傳遞長時程增強(LTP)的形成中起著重要作用。有研究表明在海馬神經(jīng)元中由NMDA受體介導的LTP過程中膜表面表達的NMDA受體數(shù)目有所上升，但對其亞基GluN2膜表面數(shù)目的變化情況及快速上膜的亞基的具體來源都不清楚。
　　目的:研究活動性依賴的GluN2亞基的快速上膜情況及其來源以便深入地地理解學習和記憶形成的

2、機制。
　　方法及結(jié)果:在本篇論文中，我們利用了化學誘導和高鉀去極化刺激兩種LTP誘導模型，重點研究了在培養(yǎng)的大鼠皮層和海馬神經(jīng)元中NMDA受體GluN2A亞基在兩種模型刺激后的膜表面表達及運輸情況。利用生物素標記技術(shù)、提取突觸后致密區(qū)蛋白組分和蛋白印記技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)兩種刺激模型下GluN2A亞基的表面表達均出現(xiàn)了上升;用普通的綠色熒光蛋白或PH敏感型的綠色熒光蛋白標記GluN2A亞基，利用免疫細胞化學和活細胞顯微技術(shù)觀察得到的結(jié)果

3、與上述結(jié)論一致。分別采用微管解聚劑Nocodazole和肌動蛋白抑制劑Cytochalasin D處理神經(jīng)元發(fā)現(xiàn)，Cytochalasin D可以抑制GluN2A上升趨勢，但Nocodazole對GluN2A的上膜情況并沒有影響;長時間（大于0.5h）使用翻譯抑制劑cycloheximide可阻斷GluN2A的上膜，但短時間使用cycloheximide不能阻斷GluN2A亞基的快速上升。同時，我們觀察到在兩種刺激模型下GluN2A亞基