大鼠下丘神經(jīng)元上NMDA和GABAA受體之間的功能交互作用.pdf

1、當(dāng)細胞膜上兩個不同的離子受體同時被激活時，他們之間往往會存在一種功能性的相互調(diào)節(jié)，即一種受體的激活會抑制或增強另一種受體的反應(yīng)，這種受體間的相互調(diào)節(jié)作用被叫做受體間的相互對話。這種受體間的相互對話對神經(jīng)元的興奮性和神經(jīng)信號的加工整合等具有重要的作用和生理意義。N-甲基-D-門冬氨酸（NMDA）型谷氨酸受體和g-氨基丁酸A（GABAA）型受體分別是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中主要的興奮性和抑制性受體。至今為止，關(guān)于這兩種受體之間的功能相互作用還缺乏系統(tǒng)

2、和詳盡的研究，特別在中樞聽覺系統(tǒng)中，關(guān)于這兩種受體之間的功能交互作用至今還未見相關(guān)的報道。下丘是中樞聽覺通路中重要的信息整合中心，NMDA受體和GABAA受體在該神經(jīng)核團上均有豐富的表達。本論文旨在探討大鼠下丘神經(jīng)元上NMDA受體和GABAA受體之間的功能交互作用及可能的機制。
　　 方法：本研究在原代培養(yǎng)的新生大鼠下丘神經(jīng)元上采用傳統(tǒng)的全細胞膜片鉗的方法研究NMDA受體和GABAA受體之間的交互作用。在對膜電流的記錄過程中采用

3、的是電壓鉗模式，并且保持被記錄細胞的膜電壓始終被鉗制在-60 mV。在本實驗中藥物的施加是通過一種被稱為“Y管給藥”的快速給藥系統(tǒng)。
　　 結(jié)果：（1）100 mM的GABA可抑制100 mM Asp在下丘神經(jīng)元激活的全細胞電流（Iasp），表明GABAA受體的激活能夠抑制NMDA受體的功能。GABAA受體的競爭性拮抗劑bicuculline（10 mM）可完全阻斷GABA激活的電流，并可消除GABA 對Iasp的抑制作用；（2

4、）100 mM的Asp對高濃度(100? mM)GABA在下丘神經(jīng)元激活的全細胞電流（IGABA）沒有影響，但對低濃度(3 mM)GABA激活的IGABA有抑制作用，表明NMDA受體的激活對GABAA受體的抑制作用是濃度依賴性的。NMDA受體的競爭性拮抗劑APV（100? mM）可完全阻斷Asp激活的電流，并可消除Asp對IGABA的抑制作用；（3）細胞外液中加入電壓依賴的鈣通道（VDCCs）的阻斷劑CdCl2不影響Asp對IGABA的

5、抑制作用，但是當(dāng)外液中無鈣或在電極內(nèi)液中加入鈣的螯合劑BAPTA時，Asp對IGABA的抑制作用消失，說明這種抑制作用是由鈣離子介導(dǎo)的，并且是鈣離子通過NMDA受體通道內(nèi)流而非經(jīng)由VDCCs內(nèi)流而發(fā)揮作用的；（4）Asp對IGABA的抑制作用可被鈣-鈣調(diào)素依賴性的蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）的抑制劑KN-62所阻斷，說明在NMDA受體和GABAA受體的功能交互作用中，CaMKⅡ起到了重要的作用。
　　 結(jié)論：本論文的研究結(jié)果表明，在