黃精多糖對小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化影響的研究.pdf

1、目的:研究黃精多糖對小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向成骨細胞分化的影響。
　　方法:1.CCK-8法檢測不同濃度的黃精多糖（5mg/L、10mg/L、25mg/L、50mg/L、100mg/L）處理組與對照組（0mg/L）作用于小鼠間充質(zhì)干細胞(BMSCs)24、48、72、96小時后對細胞增殖的影響;
　　2.采用堿性磷酸酶檢測試劑盒及堿性磷酸酶染色試劑盒檢測黃精多糖干預組和對照組成骨誘導培養(yǎng)7天后細胞堿性磷酸酶的活性及分泌情況。<

2、br>　　3.采用茜素紅染色法檢測黃精多糖干預組及對照組成骨誘導培養(yǎng)21天后礦化結節(jié)的形成情況，以進一步確定黃精多糖對BMSCs成骨分化的促進作用。
　　4.Western Blot檢測黃精多糖干預組及對照組成骨誘導培養(yǎng)7天后Runx2蛋白表達情況，以初步從蛋白水平探討黃精多糖對BMSCs促進成骨分化的分子機制。
　　5.免疫組化檢測黃精多糖干預組及對照組成骨誘導7天后的Ⅰ型膠原蛋白(COL-1)及成骨誘導14天后的骨鈣素(

3、OCN)表達情況。
　　結果:1.不同濃度的黃精多糖(5、10、25、50、100mg/L)在第1、2、3、4天對小鼠間充質(zhì)干細胞的增殖差異無統(tǒng)計學意義（p＞0.05）。
　　2.與對照組相比，黃精多糖干預組在低濃度范圍里(0～50mg/L)呈劑量依賴性地提高堿性磷酸酶活性(p＜0.05)，同時堿性磷酸酶(ALP)染色的結果顯示與上述各組堿性磷酸酶活性測定一致。
　　3.黃精多糖干預濃度為25mg/L時形成的礦化結節(jié)數(shù)

4、量要顯著高于對照組(p＜0.05)。
　　4.與對照組相比，黃精多糖干預組在濃度范圍為5mg/L～25mg/L時Runx2蛋白表達量明顯升高(p＜0.05)。
　　5.與對照組比較，黃精多糖干預組在濃度為25mg/L時明顯提高COL-1蛋白染色及OCN蛋白染色陽性細胞率（p＜0.05）。
　　結論:黃精多糖通過上調(diào)堿性磷酸酶活性、Runx2成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子基因表達水平、Ⅰ型膠原蛋白及骨鈣素表達量，從而促進小鼠骨髓間充