兔脂肪組織來源干細胞分離培養(yǎng)方法與鑒定.pdf

1、目的：建立一種簡單高效的兔脂肪組織來源干細胞(adipose-derived stem cells，ADSCs)的體外分離培養(yǎng)方法，使在兔模型中脂肪組織來源干細胞的提取方法更加簡便而且高效，為組織工程提供充足的干細胞來源。
　　方法：兔麻醉后在無菌條件下分離兔腹股溝皮下脂肪組織，剪碎成脂肪顆粒后采用0.1％I型膠原酶37℃恒溫條件下震蕩消化，用含10％胎牛血清(FBS)及1％雙抗（青霉素、鏈霉素）的高糖基礎(chǔ)培養(yǎng)基(DMEM)在細胞

2、培養(yǎng)箱中進行貼壁培養(yǎng)兔ADSCs，并對其細胞的形態(tài)、體外增殖能力進行觀察統(tǒng)計，繪制細胞增殖曲線，并對其經(jīng)過誘導(dǎo)，對其成骨、成脂肪、成軟骨能力的分化及表面標記基因表達進行分析研究。
　　結(jié)果：此方法在體外分離培養(yǎng)的兔ADSCs具有良好的細胞形態(tài)和極強的增殖能力，經(jīng)誘導(dǎo)分化，其具有成脂。成軟骨及成骨分化潛能，兔第三代ADSCs表面標記CD34、CD105陽性，Sca-1高表達，不表達CD45及SSEA-1。
　　結(jié)論：利用兔腹股