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1、目的:對(duì)貴州省血液系統(tǒng)腫瘤患者的弓形蟲(chóng)感染狀況進(jìn)行血清學(xué)和分子流行病學(xué)調(diào)查,并用多重巢式-聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(Mn-PCR-RFLP)方法進(jìn)行弓形蟲(chóng)基因分型,探討血液系統(tǒng)腫瘤患者弓形蟲(chóng)感染狀況以及貴州省弓形蟲(chóng)感染的分子流行病學(xué)特點(diǎn)。
方法:1.采集150例白血病、150例淋巴瘤患者(疾病組)和110份健康人(對(duì)照組)外周抗凝血標(biāo)本。2.采用 ELISA方法檢測(cè)疾病組及健康對(duì)照組外周血血漿中人體內(nèi)弓形蟲(chóng)特異性抗體
2、(IgG、IgM)以及循環(huán)抗原(CAg)。3.采用PCR技術(shù)擴(kuò)增疾病組和健康對(duì)照組所有外周血弓形蟲(chóng)高重復(fù)DNA片段-529 bp,以檢測(cè)弓形蟲(chóng)核酸。4.弓形蟲(chóng)高重復(fù)DNA片段(529 bp)陽(yáng)性的標(biāo)本采用Mn-PCR-RFLP法分析弓形蟲(chóng)c22-8,c29-2,L358,PK1,SAG2(5`-SAG2,3`-SAG2,alt.SAG2),BTUB,GRA6,SAG3,Apico,SAG1共10個(gè)不同遺傳標(biāo)記位點(diǎn),以鑒定弓形蟲(chóng)的基因型,
3、分析流行于貴州省弓形蟲(chóng)的基因型。另設(shè)110例正常健康人群對(duì)照,檢測(cè)上述指標(biāo)。分析貴州省血液系統(tǒng)患者弓形蟲(chóng)感染的分子流行病學(xué)特點(diǎn)。
結(jié)果:1.健康人、白血病、淋巴瘤組弓形蟲(chóng)抗體陽(yáng)性率分別為:8.18%(9/110)、18.67%(28/150)、21.33%(32/150)。3組人群中IgG陽(yáng)性率依次為6.36%(7/110)、16.00%(24/150)和20.00%(30/150),IgM陽(yáng)性率依次為0.91%(1/110)
4、、2.67%(4/150)和1.33%(2/150),CAg陽(yáng)性率依次為0.91%(1/110)、2.00%(3/150)和0.67%(1/150)。2.本次調(diào)查血液系統(tǒng)腫瘤患者及正常人中均未檢測(cè)到弓形蟲(chóng)核酸即529 bp基因片段,未能進(jìn)行弓形蟲(chóng)基因型鑒定。3. Mn-PCR-RFLP鑒定4份貴州株標(biāo)本結(jié)果顯示弓形蟲(chóng)的基因型一致,都屬于非典型蟲(chóng)株 ToxoDB#9即Chinese1。
結(jié)論:1.血液系統(tǒng)腫瘤白血病和淋巴瘤患者弓
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