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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
以貴陽(yáng)及其周邊地區(qū)貓、豬和狗等動(dòng)物弓形蟲感染的流行病學(xué)調(diào)查為基礎(chǔ),分離弓形蟲蟲株,鑒定該地理區(qū)域內(nèi)弓形蟲的基因型,為貴州省弓形蟲的防治工作提供依據(jù)。
方法:
1.采集圈養(yǎng)豬、家養(yǎng)狗和流浪貓的外周血或心臟及腦組織樣本。
2.采用 ELISA法檢測(cè)血漿中的弓形蟲抗原 CAG、抗弓形蟲抗體 IgG、IgM;PCR檢測(cè)弓形蟲特異性核酸序列529bp。結(jié)合弓形蟲抗原、抗弓形蟲抗體、弓形蟲DNA檢測(cè),
2、作為判斷弓形蟲感染的依據(jù)。
3.選擇經(jīng)確認(rèn)弓形蟲感染的動(dòng)物組織樣本,采用小鼠腹腔接種分離弓形蟲蟲株。
4.采用PCR-RFLP(限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性)和基因測(cè)序技術(shù)分析弓形蟲DNA樣本的SNP(單核苷酸多態(tài)性),鑒定研究區(qū)域內(nèi)的弓形蟲基因型。
結(jié)果:
1.采集豬70頭,家養(yǎng)狗107只,流浪貓19只。血清學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),抗弓形蟲IgG抗體陽(yáng)性率豬為70%,狗為20.56%,貓為63.16%;抗弓形蟲Ig
3、M抗體陽(yáng)性率豬為0,狗為0.93%,貓為21.05%;弓形蟲循環(huán)抗原(CAG)陽(yáng)性率豬為16.88%,狗為13.08%,貓為10.53%。PCR擴(kuò)增弓形蟲529bp特異性片段,其陽(yáng)性率豬為31.51%,狗為3.74%,貓為52.63%。綜合弓形蟲抗原、核酸和抗弓形蟲抗體的檢測(cè)結(jié)果,動(dòng)物弓形蟲感染率平均為55.61%,其中豬為80%,家養(yǎng)狗為34.58%,流浪貓為84.21%。
2.基于弓形蟲血清學(xué)和核酸檢測(cè)結(jié)果,用小鼠腹腔接種
4、法分離出5株弓形蟲貴州地理株,這些弓形蟲株有增殖慢、毒力低、易形成假包囊等生物學(xué)特點(diǎn)。
3.多重-巢式多位點(diǎn)PCR-RFLP和基因測(cè)序技術(shù)分析源自不同動(dòng)物的36個(gè)弓形蟲 DNA樣本,結(jié)果表明該地區(qū)動(dòng)物感染的弓形蟲具有相同的基因型特征。結(jié)論:
1.貴州省圈養(yǎng)豬和流浪貓的弓形蟲感染情況比較嚴(yán)重,家養(yǎng)狗的感染率則相對(duì)較低。
2.動(dòng)物弓形蟲感染以慢性或隱性感染為主,近期感染或急性感染者少見。
3.貴陽(yáng)及其
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