吳茱萸次堿對(duì)細(xì)胞色素P450酶活性的影響.pdf

1、一、目的 研究吳茱萸次堿對(duì)細(xì)胞色素P450主要酶：CYP1A2，CYP2C9， CYP2C19，CYP2D6，CYP2E1和CYP3A活性的影響，為吳茱萸次堿的開(kāi)發(fā)及臨床藥動(dòng)學(xué)和藥物相互作用預(yù)測(cè)研究提供參考。 二、方法 1．體外實(shí)驗(yàn)部分 自臨床上取得肝臟標(biāo)本后，以差速離心法制備肝臟微粒體，以Lowry 法進(jìn)行蛋白定量。在37℃的水浴中建立人肝臟微粒體孵育體系，加入藥理實(shí)驗(yàn)證明為有效劑量的吳茱萸次堿和相應(yīng)的CY

2、P450的探針?biāo)幬?。分別以咖啡因、咪噠唑侖、甲苯磺丁脲、氯唑沙宗、美托洛爾、美芬 妥因?yàn)樘结標(biāo)?，測(cè)定CYPlA2、CYP3A、CYP2C9、CYP2El、CYP2D6、 CYP2C19的活性。 2．體內(nèi)實(shí)驗(yàn)部分 按照隨機(jī)對(duì)照的原則，36只小鼠雌雄各半，性別內(nèi)各隨機(jī)分成3 對(duì)，然后性別間隨機(jī)組合成3組，每組12只小鼠，一組做對(duì)照，另兩 組分別給予25 mg·kg<'-1>·day<'-1>和50 mg·kg<'-1>·da

3、y<'-1>吳茱萸次堿，連續(xù)灌胃給藥4日，處死動(dòng)物，制備肝微粒體。分別以咖啡因、咪噠唑侖、甲 苯磺丁脲、氯唑沙宗、異喹胍、美芬妥因?yàn)樘结標(biāo)?，測(cè)定小鼠Cypla2、 Cyp3a、Cyp2c、Cyp2e1、Cyp2d的活性。 三、結(jié)果 1．體外實(shí)驗(yàn)部分 在人肝微粒體中加入?yún)擒镙谴螇A后發(fā)現(xiàn)CYPlA2、CYP2C19和CYP3A的活性隨吳茱萸次堿劑量的增加而遞減。其IC<,50>．值分別為17μmol·L<'-1>、75μ

4、moL·L<'-1>>200 μmol·L<'-1>。而CYP2C9、CYP2E1、CYP2D6的活性無(wú)明顯變化。本實(shí)驗(yàn)首次發(fā)現(xiàn)吳茱萸次堿在體外人肝微粒體中對(duì)CYP2C19有抑制作用。 2．體內(nèi)實(shí)驗(yàn)部分 與安慰劑組對(duì)照，合用吳茱萸次堿后：Cypla2、Cyp2e1、Cyp3a的活性有顯著性差別(p<0.05)。服用25mg·Kg<'-1>·day<'-1>吳茱萸次堿導(dǎo)致咖啡因代謝物產(chǎn)率增加了約40％，氯唑沙宗代謝物產(chǎn)率增加了約7

5、8％，咪噠唑侖代謝物產(chǎn)率降低了約40％；服用50mg·kg<'-1>·day<'-1>吳茱萸次堿導(dǎo)致咖啡因代謝物產(chǎn)率增加了約65％，氯唑沙宗代謝物產(chǎn)率增加了100％，咪噠唑侖代謝物產(chǎn)率降低了約48％。酶活性的改變呈劑量相關(guān)性。Cyp2c、Cyp2d的活性均無(wú)顯著性改變。 四、結(jié)論 1．吳茱萸次堿在體內(nèi)誘導(dǎo)CYPlA2的活性，在體外則抑制其活性，與國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道一致。 2．吳茱萸次堿在體內(nèi)外均抑制CYP3A的活性。