塞隆骨化學成分的分離純化與生物活性初步研究.pdf

1、本文以塞隆骨為研究對象，運用制備型高效液相色譜法和二維液相色譜法，分別從提取工藝方法的選擇、不同模式的二維正交液相色譜方法的建立、主要單體化合物的純化制備和組分化合物的活性初篩四個方面展開研究，為新藥開發(fā)奠定了一定的物質(zhì)基礎。
　　通過考察影響塞隆骨提取效果的因素，如提取方式、提取溶劑、提取時間、提取次數(shù)和料液比，對塞隆骨提取工藝進行優(yōu)化，得到了最佳提取工藝；醇提物一維分離制備采用正相DAISO Silica柱，水提物采用反相DA

2、ISO C18柱，分別考察不同洗脫程序?qū)Ψ蛛x過程的影響，最終確定了最佳制備方法工藝，正相制備色譜得到10個組分，反相得到5個組分，對樣品進行了初步砍斷分割，為后續(xù)二維分離制備提高了效率。
　　二維建立了DAISO Silica柱和YMC Diol柱聯(lián)用的新型2D-NPLC/HILIC制備色譜分離體系以及雙硅膠柱聯(lián)用（2D-NPLC/NPLC）的分離體系，具有良好選擇性和正交性，實現(xiàn)了塞隆骨醇提物組分中小極性難分離物質(zhì)和中等極性物質(zhì)

3、的一個高效分離制備，得到16個高純度化合物，部分純度達到98％以上，結(jié)合質(zhì)譜和核磁數(shù)據(jù)對其結(jié)構進行表征，表明醇提組分主要物質(zhì)為甾醇和有機酸類物質(zhì)。
　　對水提物運用建立的2D-RPLC/RPLC色譜體系，選擇親水高密度鍵合極性MP C18柱，對復雜水提組分進行了有效的分離，得到高純度單一化合物9種，結(jié)構鑒定得到其序列，多為多肽，分子量為1kD左右，為塞隆骨進一步的藥理、毒理活性研究提供新的物質(zhì)基礎。
　　塞隆骨提取物對前破骨