轉(zhuǎn)化生長因子β和基質(zhì)金屬蛋白酶在大鼠動脈鈣化發(fā)病的實驗研究.pdf

1、目的:1.建立大鼠動脈鈣化模型，觀察大鼠胸腹動脈病理切片的差異。2.通過實時熒光定量PCR法，檢測并觀察TGF-β和MMPs的mRNA在大鼠動脈鈣化模型的表達情況，并探討和闡述其在大鼠動脈鈣化形成過程中的作用及意義。3.通過安捷倫大鼠全基因組表達芯片檢測，觀察對照組與實驗組大鼠動脈鈣化的差異基因，并探討差異基因在大鼠動脈鈣化形成過程的作用及意義。
　　方法:用隨機數(shù)字表法將60只SD雄性大鼠分成2組:正常對照組和實驗組，每組30只

2、。通過使用本課題研究人員方法，皮下注射維生素D3溶液建立大鼠動脈鈣化模型。兩周后取大鼠胸腹主動脈并分為兩部分，將一部分用于石蠟包埋，為下一步做蠟塊切片使用，將另一部分保存于液氮，為下一步提取RNA及全基因組表達芯片使用。通過蘇木精-伊紅(HE)染色法觀察兩組大鼠胸腹動脈血管組織切片的病理差異，Von Kossa染色（鈣染色法）觀察兩組大鼠胸腹動脈血管內(nèi)層膜組織切片的鈣鹽沉積程度;實時熒光定量PCR法測定兩組大鼠動脈TGF-β和MMPs的

3、mRNA表達量水平。Agilent大鼠全基因表達芯片檢測兩組大鼠動脈血管組織的差異基因。
　　結(jié)果:1.Von Kossa染色結(jié)果顯示，實驗組大鼠動脈內(nèi)膜出現(xiàn)大片連續(xù)性黑褐色鈣鹽沉積，對照組大鼠動脈組織則光滑完整，無黑褐色鈣鹽沉積。2.實時熒光PCR及大鼠全基因表達芯片結(jié)果顯示，在成功建立的大鼠動脈鈣化模型中，實驗組TGF-β的mRNA表達量顯著高于正常對照組(P＜0.05);3.實時熒光PCR及大鼠全基因表達芯片結(jié)果顯示，在成功