2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、研究證明,膜蛋白CD146可以作為胃癌的早期診斷標志物。早在2012年,在美國PNAS雜志一篇名為“CD146,三陰乳腺癌上皮-基質(zhì)轉(zhuǎn)化的啟動因子”對CD146蛋白的研究推向了另一個高峰。這篇論文指出,CD146啟動了上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)機制,加速了腫瘤的轉(zhuǎn)移形成,是一新的診斷以EMT轉(zhuǎn)移機制為基礎(chǔ)的惡性腫瘤的標志物。但是這篇文章中涉及的抗CD146單克隆抗體不能直

2、接識別三陰乳腺癌的腫瘤細胞株MB-231,只能識別外在轉(zhuǎn)入質(zhì)粒后表達CD146的陰性細胞株MCF-7。這樣的抗體是很難識別活體內(nèi)腫瘤天然表達的CD146,更難以達到對活體腫瘤的早期診斷。因此我們設(shè)想以真核表達的CD146蛋白為抗原,免疫小鼠獲得抗CD146單克隆抗體,以磁性納米材料為載體,研發(fā)具有自主知識產(chǎn)權(quán)的能識別活體腫瘤的靶向探針,實現(xiàn)惡性腫瘤的早期診斷與靶向治療。
  主要的研究內(nèi)容和結(jié)果:
  1.以真核CD146蛋

3、白免疫小鼠獲得高效抗CD146單克隆抗體;
  我們通過購買的真核CD146蛋白免疫小鼠,并以此作為篩選源,完成四次clone化和Elisa體外篩選實驗后獲得五株抗CD146單克隆抗體,經(jīng)過FACS,confocal等一些列體外鑒定實驗,確定第五株為靶向性最好的一株,并命名為YY146。
  2.磁性納米材料的制備與鑒定;
  采用微乳液法,在表面活性劑NP-5與環(huán)己烷的體系中加入10-15nm的四氧化三鐵超順磁納米顆

4、粒,再體系中加入30%氨水,使體系呈弱堿性,再往體系中引入正硅酸乙酯TEOS以形成二氧化硅包裹的四氧化三鐵超順磁顆粒,接著構(gòu)建具有靶向CD146特性的磁性二氧化硅納米顆粒,并體外通過激光共聚焦顯微鏡觀察、流式細胞術(shù)等方法檢測分子探針的活性、特異性,為下一步分析該分子探針在MR/NIR活體成像的研究奠定基礎(chǔ)。
  3.靶向CD146磁性納米顆粒的體外初步研究;
  經(jīng)過流式細胞術(shù)、免疫熒光檢測,透射顯微鏡掃描等技術(shù)檢測證實所構(gòu)

5、建的分子探針可特異地與腫瘤細胞CD146抗原相結(jié)合,并保持良好的生物學活性;
  4.靶向CD146磁性納米顆粒的活體內(nèi)初步研究;
  體內(nèi)實驗研究證實在裸鼠尾靜脈注射探針4h后的MR掃描可以顯著降低腫瘤組織在T2W1的信號,近紅外顯影與6小時后能靶向顯影腫瘤,說明構(gòu)建的探針在體內(nèi)實驗中獲得不錯的靶向性,有望其作為一種新的分子影像學診斷技術(shù)應(yīng)用于臨床進行腫瘤早期或轉(zhuǎn)移的診斷。
  結(jié)論:
  本研究構(gòu)建的分子探針

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