健脾益坤方對圍絕經(jīng)期綜合征大鼠影響的實驗研究.pdf

1、目的:采用成年雌性大鼠行雙側(cè)卵巢摘除術(shù)來模擬圍絕經(jīng)期綜合征，給予健脾益坤中藥及戊酸雌二醇對該模型進(jìn)行干預(yù)，通過觀察大鼠動情周期、肛溫、降鈣素基因相關(guān)肽(calcitonin gene-related peptide，CGRP)、血清性激素水平、子宮重量系數(shù)、子宮組織形態(tài)及計量學(xué)，來探討CGRP與圍絕經(jīng)期潮熱的關(guān)系，及健脾益坤方對圍絕經(jīng)期大鼠的治療效果及作用機(jī)理，為臨床上治療圍絕經(jīng)期綜合征提供理論依據(jù)。
　　方法:健康清潔、成年未孕

2、雌性SD大鼠30只，體重為200-250g，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為假手術(shù)組6只，模型組24只。禁食12h后，模型組行雙側(cè)卵巢切除術(shù)，假手術(shù)組僅切除雙側(cè)卵巢周圍少量脂肪。術(shù)后5天，大鼠動情周期紊亂（陰道脫落細(xì)胞角化指數(shù)＜50％）為造模成功。造模成功后，將模型組大鼠隨機(jī)分為模型對照組、中藥治療組、西藥治療組、中西醫(yī)結(jié)合治療組各6只。中藥治療組給予健脾益坤水煎劑2毫升/只·天，西藥治療組給予戊酸雌二醇水溶液2毫升/只·天，中西醫(yī)結(jié)合治療組給

3、予健脾益坤方水煎劑1毫升/只·天、戊酸雌二醇水溶液1毫升/只·天，假手術(shù)組及模型對照組每天給予等體積蒸餾水灌胃。定期檢測大鼠動情周期、肛溫;治療2個月后，禁食12h，麻醉狀態(tài)下測量體重，斷頭取血，分離血清，測定CGRP、血清性激素水平;摘取子宮，稱重以計算子宮重量系數(shù)，切取部分子宮組織在光鏡下觀察子宮組織形態(tài)及計量學(xué)變化。
　　結(jié)果:
　　1大鼠動情周期的變化
　　造模前:大鼠活動頻繁，對刺激反應(yīng)靈敏，皮毛光澤柔順，動

4、情周期規(guī)律（4-5天/次）;造模后:模型對照組大鼠對外界的刺激反應(yīng)淡漠，毛色晦暗，少動，動情周期紊亂;治療后:中藥治療組、西藥治療組和中西醫(yī)結(jié)合治療組大鼠活動頻繁，反應(yīng)敏捷，皮毛光澤柔順，動情周期逐漸正常。
　　2大鼠肛溫的變化
　　從Fig.1可以看出，不同的時間點與分組之間存在交互效應(yīng)(F=2.339，P=0.001)，從肛溫隨時間變化的趨勢看，各組的區(qū)別具有統(tǒng)計學(xué)意義;模型對照組大鼠肛溫在去卵巢后明顯升高，與假手術(shù)組比

5、較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);治療組大鼠肛溫與模型對照組比較明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);中藥治療組、西藥治療組和中西醫(yī)結(jié)合治療組大鼠肛溫之間未見明顯差異（P＞0.05）。
　　3大鼠血清性激素水平的變化
　　模型對照組大鼠血清性激素水平較假手術(shù)組FSH、LH明顯升高、E2顯著降低，有顯著性差異(P＜0.01);治療組大鼠血清性激素水平較模型對照組FSH、LH明顯降低，E2顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜

6、0.01);中西醫(yī)結(jié)合治療組血清性激素水平E2較西藥治療組升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）;中藥治療組和中西醫(yī)結(jié)合治療組之間血清性激素水平FSH沒有明顯差異(P＞0.05）;各治療組大鼠血清性激素水平LH之間未見明顯差異（P＞0.05）。
　　4大鼠降鈣素基因相關(guān)肽水平的變化
　　模型對照組大鼠降鈣素基因相關(guān)肽含量較假手術(shù)組顯著升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）;治療組降鈣素基因相關(guān)肽水平較模型對照組顯著降低，有

7、顯著性差異（P＜0.01）;中西醫(yī)結(jié)合治療組降鈣素基因相關(guān)肽較西藥治療組降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）。
　　5大鼠子宮重量系數(shù)的變化
　　模型對照組大鼠子宮重量系數(shù)較假手術(shù)組明顯降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);治療組大鼠子宮重量系數(shù)較模型對照組明顯升高，有顯著性差異(P＜0.01);中西醫(yī)結(jié)合治療組和假手術(shù)組之間子宮重量系數(shù)沒有明顯差異（P＞0.05）。
　　6子宮組織形態(tài)及計量學(xué)的變化
　　

8、6.1子宮病理組織形態(tài)學(xué)的觀察
　　光鏡下觀察:假手術(shù)組宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞及腺上皮細(xì)胞多呈高柱狀，腺體排列較密集，腺腔大小不等，肌層肌纖維規(guī)則一致，漿膜層光滑;模型對照組宮內(nèi)膜明顯萎縮變薄，腺體細(xì)胞多為低柱狀，腺體少，肌層變薄，肌纖維排列紊亂，漿膜層萎縮、不光滑;中藥治療組宮內(nèi)膜較模型對照組輕度增厚，腺體增多，肌層排列較規(guī)則，漿膜層尚光滑。西藥治療組和中西醫(yī)結(jié)合治療組宮內(nèi)膜較模型對照組明顯增生，呈高柱狀，腺體較多，肌層肌纖維排列較規(guī)則

9、，漿膜層尚光滑。
　　6.2子宮形態(tài)計量學(xué)的測定結(jié)果
　　與假手術(shù)組比較，模型對照組宮內(nèi)膜厚度、宮壁厚度明顯下降，有顯著性差異(P＜0.01);結(jié)合治療組宮內(nèi)膜形態(tài)計量各指標(biāo)較模型對照組明顯增厚，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01）。
　　結(jié)論:
　　1圍絕經(jīng)期潮熱、內(nèi)分泌功能紊亂、組織病理學(xué)改變等證實圍絕經(jīng)期綜合征的動物模型成功建立。
　　2健脾益坤方能夠改善圍絕經(jīng)期大鼠的一般狀況，縮短大鼠動情周期，促進(jìn)其恢

10、復(fù)正常。治療組大鼠血清性激素水平、子宮重量系數(shù)、子宮組織形態(tài)及計量學(xué)的變化說明中藥在改善內(nèi)分泌、卵巢功能等方面具有優(yōu)勢，同時可以降低肛溫和降鈣素基因相關(guān)肽的水平，改善圍絕經(jīng)期大鼠潮熱癥狀，為臨床上治療圍絕經(jīng)期綜合征奠定了實驗基礎(chǔ)。
　　3通過對中藥治療組、西藥治療組、中西醫(yī)結(jié)合治療組結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析，中西醫(yī)結(jié)合組療效較優(yōu)，可以明顯改善大鼠的圍絕經(jīng)期癥狀，結(jié)果表明中西醫(yī)結(jié)合治療可以減少激素的用量及相關(guān)不良反應(yīng)。所以應(yīng)把現(xiàn)代醫(yī)學(xué)與中醫(yī)