大負(fù)荷力量訓(xùn)練中機(jī)體細(xì)胞和分子免疫變化規(guī)律的研究.pdf

1、本研究的目的是探討大負(fù)荷力量訓(xùn)練中機(jī)體免疫、內(nèi)分泌等變化規(guī)律，尤其是機(jī)體細(xì)胞免疫與分子免疫變化規(guī)律，旨在建立監(jiān)測(cè)運(yùn)動(dòng)員訓(xùn)練過(guò)程中身體機(jī)能狀態(tài)的敏感新指標(biāo)。研究分兩部分。 實(shí)驗(yàn)Ⅰ.大負(fù)荷力量訓(xùn)練中機(jī)體免疫、內(nèi)分泌、血液學(xué)指標(biāo)變化規(guī)律的研究。 本研究分為力量訓(xùn)練組和對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組為14名省級(jí)優(yōu)秀男子舉重運(yùn)動(dòng)員，連續(xù)觀察5周，其間，受試者按照要求完成“訓(xùn)練2周—調(diào)整1周—訓(xùn)練2周”的規(guī)定負(fù)荷的舉重訓(xùn)練?！坝?xùn)練2周”中，每日兩次

2、舉重訓(xùn)練課，每周訓(xùn)練6天，平均訓(xùn)練負(fù)荷為：強(qiáng)度5-8RM，大級(jí)別日訓(xùn)練量50,000kg，小級(jí)別日訓(xùn)練量30,000kg；“調(diào)整1周”中每日只進(jìn)行一次小運(yùn)動(dòng)量的舉重練習(xí)課。對(duì)照組為同齡男子散手業(yè)余培訓(xùn)班成員，身體健康，在試驗(yàn)期采血前一周均未進(jìn)行大負(fù)荷力量等練習(xí)。于試驗(yàn)前及訓(xùn)練開始后的每個(gè)周末采血，測(cè)試血清肌酸激酶（CK）、血尿素氮（BUN）；血睪酮（T）、血皮質(zhì)醇（C）、血黃體生成素（LH）、血卵泡刺激素（FSH）、泌乳素（PRL）；紅

3、細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（Hb）、網(wǎng)織紅細(xì)胞（Ret）；淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD14+、CD16+、CD56+、HLA-DR+、Vα-24、Vβ-11等）；外周血白細(xì)胞的白介素2、4、10（IL-2、IL-4、IL-10）和γ-干擾素（IFN-γ）的基因表達(dá)（Real Time RT-PCR方法，定量測(cè)定mRNA）等。 結(jié)果顯示:在兩個(gè)“訓(xùn)練2周”中，受試者疲勞感明顯，CK、BUN均顯著性升高，T略有下降

4、、C略有升高、T/C呈下降趨勢(shì)、LH和FSH有所波動(dòng)；在“調(diào)整1周”中，上述指標(biāo)有所回復(fù)。在“訓(xùn)練2周—調(diào)整1周—訓(xùn)練2周”中，Hb呈較明顯下降變化，在“調(diào)整1周”末降至最低點(diǎn)，與試驗(yàn)前比較平均降低8g/L，在試驗(yàn)?zāi)〩b回復(fù)；Ret呈明顯上升變化。在“訓(xùn)練2周—調(diào)整1周—訓(xùn)練2周”中，CD8+、CD14+、CD16+、CD56+、Vα-24呈升高變化，HLA-DR+僅在前一個(gè)“訓(xùn)練2周”中升高，CD3+、CD4+、Vβ-11、有所波動(dòng)，

5、CD4+/CD8+在第一個(gè)“訓(xùn)練2周”中明顯下降，在隨后逐漸上升。在“訓(xùn)練2周—調(diào)整1周—訓(xùn)練2周”中，IL-2、IL-4的mRNA表達(dá)先增加后降低，IL-10的mRNA表達(dá)呈持續(xù)降低變化，IFN-γ的mRNA表達(dá)以及IFN-γmRNA / IL-4 mRNA比值均在訓(xùn)練期明顯降低，在調(diào)整期明顯回復(fù)。 對(duì)照組運(yùn)動(dòng)員上述指標(biāo)無(wú)明顯變化。 結(jié)論： 1、大負(fù)荷力量訓(xùn)練導(dǎo)致CK、BUN顯著性升高。 2、大負(fù)荷力量

6、訓(xùn)練導(dǎo)致皮質(zhì)醇、泌乳素升高，LH升高、FSH下降。 3、大負(fù)荷力量訓(xùn)練導(dǎo)致一過(guò)性紅細(xì)胞、血紅蛋白下降，但網(wǎng)織紅細(xì)胞明顯增高，表明訓(xùn)練沒(méi)有導(dǎo)致造血功能抑制。 4、大負(fù)荷力量訓(xùn)練導(dǎo)致CD8+增加，CD4+/CD8+第一次“訓(xùn)練2周”下降而第二次“訓(xùn)練2周”沒(méi)有下降。而IL-2、IL-10、IFN-γ的基因表達(dá)下降，IL-2、IFN-γ的基因表達(dá)、IFN-γmRNA/IL-4mRNA隨負(fù)荷的增加下降，表明這三個(gè)指標(biāo)是反映訓(xùn)練狀

7、態(tài)的免疫機(jī)能敏感指標(biāo)。反映T細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)功能向抑制方向發(fā)展。 5、考慮到IFN-γmRNA主要來(lái)自Th1細(xì)胞，IL-4mRNA主要來(lái)自Th2細(xì)胞，IFN-γmRNA/IL-4mRNA一定程度上可反映Th1/Th2，說(shuō)明大運(yùn)動(dòng)量訓(xùn)練導(dǎo)致Th1/Th2平衡向Th2方向發(fā)展。 實(shí)驗(yàn)Ⅱ.國(guó)家男子排球隊(duì)員大賽前集訓(xùn)期間細(xì)胞和分子免疫變化規(guī)律的研究。 為了驗(yàn)證上述實(shí)驗(yàn)中有關(guān)細(xì)胞因子基因表達(dá)與體能狀態(tài)的關(guān)系，本研究進(jìn)一步以國(guó)家

8、男子排球隊(duì)員為對(duì)象，觀察了為期2個(gè)月的“聯(lián)賽結(jié)束后階段”--“集訓(xùn)中階段”--“奧運(yùn)選拔賽前階段”(聯(lián)賽結(jié)束后階段，隊(duì)員剛剛結(jié)束國(guó)內(nèi)聯(lián)賽，身體最疲勞；集訓(xùn)中階段，運(yùn)動(dòng)員主要進(jìn)行技、戰(zhàn)術(shù)訓(xùn)練，不進(jìn)行大運(yùn)動(dòng)量訓(xùn)練，并進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)和醫(yī)療干預(yù)；奧運(yùn)選拔賽前階段，隊(duì)員競(jìng)技狀態(tài)調(diào)至最佳，準(zhǔn)備進(jìn)行比賽。由于客觀原因，無(wú)法顯示國(guó)家隊(duì)的訓(xùn)練計(jì)劃、訓(xùn)練負(fù)荷、訓(xùn)練量、訓(xùn)練內(nèi)容等，但總體上此次集訓(xùn)以調(diào)整體能為主要目的)。分集訓(xùn)前、集訓(xùn)中、集訓(xùn)后共三次空腹采血，測(cè)試

9、血清肌酸激酶（CK）、尿素氮（BUN）；紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（Hb）；白細(xì)胞、CD3+、CD4+、CD8+、CD14+；外周血白細(xì)胞的白介素2、4、10（IL-2、IL-4、IL-10）和γ-干擾素（IFN-γ）的基因表達(dá)（Real Time RT-PCR方法，定量測(cè)定mRNA）等。 結(jié)果顯示：訓(xùn)練中CK、BUN顯著性下降；RBC、Hb不變；白細(xì)胞、CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+無(wú)顯著性變化，CD14+顯

10、著性下降；訓(xùn)練前后IL-2的基因表達(dá)無(wú)顯著性變化，IFN-γ基因表達(dá)呈增加趨勢(shì)，IL-4的基因表達(dá)顯著性下降，IFN-γmRNA/IL-4mRNA顯著性升高，IL-10基因表達(dá)顯著性增加。 結(jié)論： 1、調(diào)整性訓(xùn)練導(dǎo)致CK、BUN下降，提示運(yùn)動(dòng)員機(jī)能有所恢復(fù)。 2、調(diào)整性訓(xùn)練導(dǎo)致外周血白細(xì)胞IFN-γ基因表達(dá)呈增加趨勢(shì)、IL-4基因表達(dá)顯著性下降、IFN-γmRNA/IL-4mRNA顯著性增加，IL-10基因表

11、達(dá)顯著性增加。提示這些指標(biāo)是排球訓(xùn)練中反映機(jī)能狀態(tài)的免疫機(jī)能敏感指標(biāo)。 3、調(diào)整性訓(xùn)練中Th1/Th2平衡向Th1方向移動(dòng)。 本研究的創(chuàng)新 1.本研究中采用的細(xì)胞因子mRNA定量方法是導(dǎo)師課題組的專利技術(shù)。專利名稱：生理狀態(tài)下外周血中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10基因表達(dá)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，專利號(hào)分別是：200310109560.2;200310109561.7;200310109562.1;20

12、0310109559.x。 2.首次采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法在力量訓(xùn)練及排球運(yùn)動(dòng)員訓(xùn)練中檢測(cè)白細(xì)胞IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的基因表達(dá)。檢測(cè)這些細(xì)胞因子的mRNA與檢測(cè)血液中這些細(xì)胞因子的蛋白水平有所不同，前者定位在細(xì)胞內(nèi)，不論其以自分泌還是以旁分泌形式發(fā)揮作用，均能反映細(xì)胞功能；后者是這些因子分泌、排泄、代謝、以及與配體結(jié)合等因素的綜合結(jié)果。因此，檢測(cè)血中因子（蛋白質(zhì)水平）是不能替代檢測(cè)細(xì)胞mRNA的。