靈芝中三萜類化合物的提取及其抗氧化活性研究.pdf

1、近年來,隨著靈芝人工養(yǎng)殖面積的逐步擴大，人們越來越關注于靈芝相關產(chǎn)品的開發(fā)和研究。但目前，靈芝中功能成分的研究不夠完善，一些有效活性成分沒有得到充分利用，易造成靈芝資源的浪費。因此，本文以山東冠縣人工培育的南韓靈芝作為原料，探究其中的活性成分----靈芝三萜類化合物，通過實驗提高其得率，并對靈芝三萜進行了初步分離純化和鑒定，研究了其抗氧化活性。本文主要通過對比不同提取方法，利用響應面優(yōu)化設計，得出靈芝三萜的最優(yōu)提取工藝條件。利用大孔樹脂

2、，對粗提取液進行分離純化，通過篩選大孔樹脂、靜態(tài)及動態(tài)吸附動力學實驗，摸索分離純化靈芝三萜的洗脫條件。另外，對靈芝三萜類化合物進行了進一步分析，改進了高效液相色譜條件，并串聯(lián)質譜法對靈芝三萜類物質進行了鑒定。最后，對比不同提取方法所得靈芝三萜提取液，進行抗氧化活性研究。
　　本研究主要內容包括：⑴采用超高壓輔助的方法提取靈芝中的三萜類物質，并與傳統(tǒng)浸提方法、超聲輔助提取方法進行了比較，通過對工藝條件進行響應面優(yōu)化設計，發(fā)現(xiàn)超高壓輔

3、助提取所得靈芝三萜得率最高，提取時間最短。最佳工藝條件為：料液比1:26g/mL，乙醇濃度96％，設定壓力為295 MPa，溫度為40℃，時間為5min，預測靈芝三萜最大得率為1.3200%。⑵利用大孔樹脂將超高壓輔助提取得到的靈芝三萜粗提液進行分離純化，在篩選大孔樹脂、靜態(tài)和動態(tài)吸附動力學實驗的基礎上，得出最優(yōu)條件為：大孔樹脂型號為AB-8，上樣量30mL,保持流速為2 BV/h，pH為4，按蒸餾水、乙醇濃度依次為15%、35%、95

4、%的順序進行洗脫。⑶考察高效液相色譜技術分離靈芝三萜的色譜條件，最終選擇流動相為乙腈-水。通過液相色譜-質譜法綜合分析靈芝中的三萜類成分，初步推測提取液中含靈芝酸類三萜成分。⑷考察靈芝中三萜類成分的體外抗氧化實驗，以DPPH自由基、羥自由基、超氧陰離子自由基的清除率和鐵離子還原力為依據(jù),對照Vc和BHT，判定抗氧化能力。超高壓輔助方法提取所得靈芝三萜體外抗氧化能力優(yōu)于其他兩種方法，高濃度的靈芝三萜體外抗氧化能力高于低濃度，展現(xiàn)出一定強度