TRPC6在Barrett食管發(fā)生中的作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  Barrett食管(Barrett’s esophagus,BE)被定義為食管復(fù)層鱗狀上皮被單層柱狀上皮所取代的病理現(xiàn)象。BE是胃食管反流?。℅astroesophageal reflex disease,GERD)的并發(fā)癥,與食管腺癌的發(fā)生密切相關(guān)。它已經(jīng)被公認為是食管腺癌最重要的癌前病變,其發(fā)展為食管腺癌的危險性高達正常人的30~50倍。目前抑酸治療對反流性食管炎治療有效,從而減少BE的發(fā)生。這提示酸性刺激在BE的

2、發(fā)生過程中起到重要作用,但其具體發(fā)生機制目前尚不清楚,因此本課題擬通過研究酸性刺激如何促進BE發(fā)生的作用機制,為BE的臨床治療靶點提供理論支持。
  方法:
  1.鈣離子成像技術(shù)檢測不同pH值及阻斷劑對SHEE細胞內(nèi)鈣離子的變化。
  2.免疫組織化學(xué)方法檢測正常人食管下段粘膜和Barrett食管下段病變粘膜中CDX2、TRPC6的表達情況。
  3.免疫印跡法檢測pH處理24小時以后HEEC細胞株中CDX2、

3、TRPC6的蛋白表達情況。
  結(jié)果:
  1.鈣離子成像技術(shù)結(jié)果顯示:(1)與對照組(pH7.4)比較,在pH值為7.0、6.5、6.0時,SHEE細胞內(nèi)的鈣離子水平無明顯差異(P>0.05),在pH值為5.5、5.0時,SHEE細胞內(nèi)的鈣離子水平明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);(2)加入細胞內(nèi)鈣螯合劑BAPTA-AM和TRPC6阻斷劑SKF96365后,SHEE細胞內(nèi)鈣離子濃度增高被顯著抑制(P<0.05)。

4、
  2.免疫組織化學(xué)法結(jié)果顯示:CDX2、TRPC6在正常食管粘膜組織和BE食管粘膜組織中均有表達,與正常食管粘膜組(NE)比較,Barrett食管粘膜組(BE)中的表達水平均明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),且CDX2與TRPC6在BE中的表達具有相關(guān)性。
  3.免疫印跡結(jié)果顯示:pH值為5.5處理HEEC細胞24小時后與對照組(pH7.2)相比TRPC6和CDX2蛋白表達上調(diào)(P<0.05),加入阻斷劑BA

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