2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  本研究為了探討miR-146a在變應(yīng)性鼻炎特異性免疫治療中所發(fā)揮的作用及其相關(guān)作用機(jī)制,對其在變應(yīng)性鼻炎患者鼻黏膜中的表達(dá)情況進(jìn)行檢測,隨后通過建立變應(yīng)性鼻炎小鼠模型并研究進(jìn)行特異性免疫治療時該小鼠模型中的miR-146a所發(fā)揮的作用,旨在為尋找新的特異性免疫增效因子并將之應(yīng)用于臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
  方法:
  (1)熒光定量PCR法檢測變應(yīng)性患者以及非變應(yīng)性鼻炎人群鼻黏膜中miR-146amRNA的表達(dá)

2、。
  (2)基礎(chǔ)致敏階段:以BALB/c小鼠為對象,依照50μg卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)、5 mg氫氧化鋁凝膠為佐劑,加入1 mL滅菌生理鹽水配制成懸濁液,隨后對BALB/c小鼠進(jìn)行腹腔注射,注射時間為隔日1次,總共注射7次;強(qiáng)化致敏階段:將小鼠進(jìn)行基礎(chǔ)致敏之后,用5%OVA滅菌生理鹽水溶液對各組實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行滴鼻,每側(cè)用量為10μL,頻率為每日1次,以此進(jìn)行鼻腔激發(fā),對AR模型組分別連續(xù)激發(fā)10天、20天,對照組小

3、鼠依照上述相同方法用0.9%滅菌生理鹽水進(jìn)行腹腔注射,隨后再用0.9%滅菌生理鹽水進(jìn)行滴鼻。酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測各組小鼠外周血OVA-sIgE含量,HE染色法觀察各組小鼠鼻黏膜組織形態(tài)學(xué)變化情況,用熒光定量PCR檢測各組小鼠鼻黏膜中miR-146amRNA的表達(dá)情況。
  (3)分別用OVA(NPVO)、miR-146a(NPVm)和OVA+miR-146a(NPVom)納米顆粒疫苗作用于變應(yīng)性鼻炎小鼠模型,觀察進(jìn)行上述操

4、作后小鼠癥狀和相關(guān)指標(biāo)的的變化情況。
  結(jié)果:
  (1)miR-146a在變應(yīng)性鼻炎患者鼻黏膜組織中的相對表達(dá)量明顯低于非變應(yīng)性鼻炎患者鼻黏膜組織(P<0.01);
  (2)造模結(jié)束后對小鼠鼻黏膜觀察結(jié)果表明,AR模型組小鼠均具有典型的變應(yīng)性鼻炎臨床癥狀,其鼻黏膜上皮結(jié)構(gòu)紊亂,炎性細(xì)胞浸潤明顯,纖毛部分融合甚至脫落;血清OVA-sIgE的濃度明顯高于對照組(P<0.05),miR-146a在AR模型組小鼠的鼻黏膜

5、組織中的相對表達(dá)量明顯低于正常鼻黏膜組織(P<0.01)。
  (3) NPVo組小鼠的變應(yīng)性鼻炎癥狀明顯加重;NPVm處理組小鼠的變應(yīng)性鼻炎相關(guān)反應(yīng)無顯著變化;NPVom處理組小鼠對變影響鼻炎相關(guān)反應(yīng)表現(xiàn)出了明顯的抑制作用;ELISA檢測結(jié)果表明,各組小鼠的血清以及鼻黏膜中的sIgE以及IL-4水平亦明顯增高;流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),OVA特異性抗原調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的增殖活性顯著上升;各組AR模型小鼠鼻黏膜以及脾臟中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的增

6、殖活性明顯低于正常對照組;分別用NPVo和NPVm處理的AR小鼠,其調(diào)節(jié)性T細(xì)胞增殖活性并未發(fā)生明顯變化,而當(dāng)用NPVom作用小鼠后,該組小鼠的T細(xì)胞增殖活性發(fā)生明顯增高;進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),NPVom處理組小鼠的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞具有OVA特異性;NPVm或者NPVom作用小鼠后,能夠使DCs中TGF-βmRNA及其相應(yīng)蛋白的表達(dá)顯著增高;用na(i)ve CD4+T細(xì)胞與NPV致敏的DCs進(jìn)行共培養(yǎng),結(jié)果表明NPVm/NPVom能夠顯著使na

7、(i)ve CD4+ CD25-T細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)镃D4+ CD25+ Foxp3+TGF+β+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞;在用OVA作用后,由NPVom誘導(dǎo)的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的增殖活性顯著增高,而由NPVm誘導(dǎo)的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的增殖活性則無明顯變化;用牛血清白蛋白(BSA)作用于NPVom致敏DCs的增值情況進(jìn)行檢測,結(jié)果表明調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的增殖活性無顯著影響;分別將由NPVom誘導(dǎo)的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞以及由NPVm誘導(dǎo)的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞通過過繼性轉(zhuǎn)移的方式作用于變應(yīng)性鼻

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