細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)蛋白表皮生長因子和肌腱蛋白在仿刺參再生過程中的表達(dá)分析.pdf

1、分類號：密級：學(xué)校代碼：10165學(xué)號：201211001054連掌師耗火擎碩士學(xué)位論文②細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)蛋白表皮生長因子和肌腱蛋白在仿刺參再生過程中的表達(dá)分析作者姓名：學(xué)科、專業(yè)：研究方向：導(dǎo)師姓名：巴華忠海洋生物學(xué)海洋動(dòng)物發(fā)育生物學(xué)侯林教授20l5年5月遼寧師范大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要海參有很強(qiáng)的再生能力，目前可以確定許多重要基因與再生過程的分子機(jī)制以及細(xì)胞問的信號通路相關(guān)。Fibropellinia基因的產(chǎn)物形成復(fù)雜的纖維狀結(jié)構(gòu)且與其他

2、透明層的組件一起構(gòu)成細(xì)胞粘附的胞外基質(zhì)。透明層是一個(gè)復(fù)雜的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，在胚胎發(fā)育的整個(gè)過程中都覆蓋在海參胚胎的周圍，在胚胎發(fā)育的某些特定時(shí)期，細(xì)胞可以在透明層上面進(jìn)行附著和遷移。Tenascin蛋白表達(dá)在胚胎發(fā)育過程中以及成體正常組織的傷口愈合，神經(jīng)再生等過程，且腫瘤組織細(xì)胞中也有明顯的表達(dá)。在本研究中，我們首次克隆了仿刺參中fibropellin婦和tenascin的全長eDNA，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示日本仿刺參fibropellinia(Ajf

3、nia)eDNA全長1390個(gè)堿基，編碼199個(gè)氨基酸、tenascin(彳，tenascin)為1366個(gè)堿基，編碼179個(gè)氨基酸。通過生物信息學(xué)方法分析了這兩個(gè)基因的結(jié)構(gòu)和特點(diǎn)。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR和原位雜交(刪)技術(shù)分析了仿刺參再生過程中的細(xì)胞外基質(zhì)重塑的過程中這兩個(gè)基因的表達(dá)模式。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Ajfnia和Ajtenascin在再生組織的表達(dá)水平高于正常組織。在仿刺參進(jìn)行吐臟處理后，Ajfnia和Ajtenascin在腸道和呼吸

4、道的最高表達(dá)水平分別出現(xiàn)在第15日和20日。在體壁早期的再生階段，Ajfnia和Ajtenascin的最高表達(dá)水平出現(xiàn)在35分鐘和45分鐘，隨后，表達(dá)量均有所下降，然后在5至7d再次出現(xiàn)表達(dá)量的峰值。原位雜交技術(shù)分析彳，咖脅和Ajtenascin基因在仿刺參體內(nèi)的體壁、縱肌、腸道和呼吸道樹中的表達(dá)部位的時(shí)發(fā)現(xiàn)：在體壁的表皮、真皮和結(jié)締組織中，腸道的黏膜和黏膜下層，呼吸樹的粘膜細(xì)胞及末端的一層或多層鱗狀上皮細(xì)胞中目的基因表達(dá)較多。所有上述