細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子在糖尿病腎病中的表達(dá)和意義.pdf

1、研究目的： 1．建立糖尿病大鼠模型，觀察糖尿病大鼠腎臟細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(extracelIularmatrix metalloproteinase inducer，EMMPRIN)表達(dá)的變化，探討糖尿病腎病發(fā)生、發(fā)展的機制。 2．觀察高糖對體外培養(yǎng)的人腎小球系膜細(xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子表達(dá)的影響，探討糖尿病腎病腎小球細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)積聚的機制。

2、 研究方法： 1．將SD大鼠隨機分成正常對照組和糖尿病模型組。腹腔注射鏈脲佐菌素(55rag·kg<'-1>)誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型，在0，4，8周末分批處死大鼠，用免疫組化檢測EMMPRIN，MMP．2，cTGF和PDGF表達(dá)，圖象分析儀半定量分析。 2．系膜細(xì)胞培養(yǎng)：系膜細(xì)胞分別在對照組糖濃度(5mmol/L)、高糖濃度(25mmol/L)的條件下培養(yǎng)Oh、12h、24h和48h，借助免疫細(xì)胞化學(xué)、RT-

3、PCR等方法檢測細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子和基質(zhì)金屬蛋白酶2表達(dá)情況。 研究結(jié)果： 1.正常大鼠EMMPRIN，MMP-2表達(dá)在大鼠腎小球系膜細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、包曼氏囊壁層上皮細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞，造模后4周末和8周末時糖尿病大鼠EMMPRIN，MMP-2比正常組下降P<0.05)，糖尿病大鼠CTGF，PDGF表達(dá)比正常組升高(P<0.05)。 2．系膜細(xì)胞培養(yǎng)時，高糖組在24h,48h可使培養(yǎng)的系膜

4、細(xì)胞EMMPRIN mRNA和蛋白與正常組相比下降(P<0.05)、高糖組在48h MMP-2 mRNA和蛋白表達(dá)與正常組相比下降(P<0.05)。 研究結(jié)論： 1．糖尿病腎病時腎小球細(xì)胞外基質(zhì)的積聚不僅是由于ECM合成增多，ECM降解減少也起重要作用。 2．證實糖尿病時腎小球EMMPRIN表達(dá)水平降低，這可能是引起細(xì)胞外基質(zhì)降解減少的原因之一。 3．高糖使培養(yǎng)的系膜細(xì)胞內(nèi)EMMPRIN，