延伸蛋白2基因在仿刺參再生過程中的表達分析.pdf

1、分類號：密級：學校代碼：學號：遣掌師耗大學10165201111206碩士學位論文延伸蛋白2基因在仿刺參再生過程中的表達分析作者姓名：學科、專業(yè)：研究方向：導師姓名：梅艷麗細胞生物學海洋動物細胞生物學侯林教授2014年5月延伸蛋白2基因在仿刺參再生過程中的表達分析摘要延伸體(elongator)是由ELPl3核心亞體復合物和ELP46較小亞體復合物構(gòu)成的一個多蛋白復合物。在酵母和人類中，延伸體蛋白復合物具有高度的保守性。它參與RNA聚合

2、酶Ⅱ介導的轉(zhuǎn)錄延伸、tRNA修飾、細胞分裂、細胞骨架構(gòu)建等許多細胞調(diào)控過程，在其調(diào)控過程中起到重要作用。延伸蛋白2(ELP2)是延伸體蛋白復合物中的一員，因此在生物體中也參與著重要的生理過程，對于生物體的生長和發(fā)育起著不容忽視的重要作用。本文首次采用基因克隆(RACE)技術(shù)獲得了仿刺參延伸蛋白2(Ajelp2)基因的全長cDNA序列，該全長序列包含3058bp堿基對，包括54bp5’端非編碼區(qū)，526bp3’端非編碼區(qū)和一個2478bp

3、的開放閱讀框編碼825個氨基酸。該序列的分子量是916kDa和等電點為584。通過與其他物種的序列進行比對發(fā)現(xiàn)，Ajetp2基因序列具有較高的保守性。通過原位雜交技術(shù)分析了Ajetp2基因在仿刺參不同組織中的表達部位，該實驗結(jié)果顯示Ajetp2基因在仿刺參的各組織中均有表達，尤其是在體壁和腸中的表達較強。為了檢測Ajelp2基因在仿刺參的不同組織的不同再生階段的表達量，我們使用了RealTimePCR技術(shù)進行了檢測。實驗結(jié)果顯示Aje勿

4、2基因在腸和呼吸樹中的表達趨勢相似，都是隨著組織的再生Ajetp2基因的表達量也逐漸上調(diào)，并且在15d時表達量最高，隨著組織恢復到正常大小，該基因的表達量也逐漸下調(diào)，最后恢復到正常水平。在體壁組織中，在再生的早期階段Ajetp2基因表達量出現(xiàn)短暫且明顯的上調(diào)趨勢，隨后表達量下調(diào)，在50min又出現(xiàn)明顯的上調(diào)。在體壁再生的后期階段，隨著組織的再生，彳jetp2基因表達量逐漸上調(diào)，最后恢復到正常水平。上述實驗結(jié)果及分析表明Ajetp2基因在