延伸蛋白2基因在仿刺參再生過程中的表達(dá)分析.pdf

1、分類號：密級：學(xué)校代碼：學(xué)號：遣掌師耗大學(xué)10165201111206碩士學(xué)位論文延伸蛋白2基因在仿刺參再生過程中的表達(dá)分析作者姓名：學(xué)科、專業(yè)：研究方向：導(dǎo)師姓名：梅艷麗細(xì)胞生物學(xué)海洋動物細(xì)胞生物學(xué)侯林教授2014年5月延伸蛋白2基因在仿刺參再生過程中的表達(dá)分析摘要延伸體(elongator)是由ELPl3核心亞體復(fù)合物和ELP46較小亞體復(fù)合物構(gòu)成的一個多蛋白復(fù)合物。在酵母和人類中，延伸體蛋白復(fù)合物具有高度的保守性。它參與RNA聚合

2、酶Ⅱ介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄延伸、tRNA修飾、細(xì)胞分裂、細(xì)胞骨架構(gòu)建等許多細(xì)胞調(diào)控過程，在其調(diào)控過程中起到重要作用。延伸蛋白2(ELP2)是延伸體蛋白復(fù)合物中的一員，因此在生物體中也參與著重要的生理過程，對于生物體的生長和發(fā)育起著不容忽視的重要作用。本文首次采用基因克隆(RACE)技術(shù)獲得了仿刺參延伸蛋白2(Ajelp2)基因的全長cDNA序列，該全長序列包含3058bp堿基對，包括54bp5’端非編碼區(qū)，526bp3’端非編碼區(qū)和一個2478bp

3、的開放閱讀框編碼825個氨基酸。該序列的分子量是916kDa和等電點(diǎn)為584。通過與其他物種的序列進(jìn)行比對發(fā)現(xiàn)，Ajetp2基因序列具有較高的保守性。通過原位雜交技術(shù)分析了Ajetp2基因在仿刺參不同組織中的表達(dá)部位，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Ajetp2基因在仿刺參的各組織中均有表達(dá)，尤其是在體壁和腸中的表達(dá)較強(qiáng)。為了檢測Ajelp2基因在仿刺參的不同組織的不同再生階段的表達(dá)量，我們使用了RealTimePCR技術(shù)進(jìn)行了檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Aje勿

4、2基因在腸和呼吸樹中的表達(dá)趨勢相似，都是隨著組織的再生Ajetp2基因的表達(dá)量也逐漸上調(diào)，并且在15d時表達(dá)量最高，隨著組織恢復(fù)到正常大小，該基因的表達(dá)量也逐漸下調(diào)，最后恢復(fù)到正常水平。在體壁組織中，在再生的早期階段Ajetp2基因表達(dá)量出現(xiàn)短暫且明顯的上調(diào)趨勢，隨后表達(dá)量下調(diào)，在50min又出現(xiàn)明顯的上調(diào)。在體壁再生的后期階段，隨著組織的再生，彳jetp2基因表達(dá)量逐漸上調(diào)，最后恢復(fù)到正常水平。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析表明Ajetp2基因在