枳實(shí)對功能性消化不良大鼠胃Cajal間質(zhì)細(xì)胞增殖及其SCF-c-Kit信號通路的影響.pdf

1、目的:探討枳實(shí)對功能性消化不良（functional dyspepsia，F(xiàn)D）大鼠胃Cajal間質(zhì)細(xì)胞(interstitial cells of Cajal，ICC)增殖及其SCF/c-Kit信號的影響。
　　方法:①48只健康SD大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分成正常組、模型組、多潘立酮組、枳實(shí)低劑量組、枳實(shí)中劑量組和枳實(shí)高劑量組，每組8只。②除正常組外，其余五組均采用改良夾尾刺激法制作FD大鼠模型，于造模同一天分別使用枳實(shí)低劑量水煎劑

2、、枳實(shí)中劑量水煎劑、枳實(shí)高劑量組水煎劑（低中高劑量濃度分別為0.50g.ml-1，1.0g.ml-1，2.0g.m1-1）、多潘立酮（濃度為0.30mg.ml-1）進(jìn)行灌胃。③4w后觀察各組大鼠胃大體情況，HE染色觀察各組大鼠胃組織學(xué)改變，測定各組大鼠胃排空率，透射電鏡觀察各組大鼠胃竇ICCs超微結(jié)構(gòu)的變化，ELISA法檢測各組大鼠腹主動(dòng)脈血清SCF的含量，免疫熒光法檢測各組大鼠胃竇組織酪氨酸蛋白激酶受體(Receptortyrosin

3、e kinase，c-Kit)和干細(xì)胞生長因子（stem cell factor，SCF）的表達(dá)，RT-PCR法檢測各組大鼠胃竇組織c-Kit mRNA、SCF mRNA的表達(dá)，WesternBlot法檢測各組大鼠胃竇組織c-Kit蛋白、SCF蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:①模型組大鼠胃殘留內(nèi)容物較多，正常組、枳實(shí)低、中、高劑量組及多潘立酮組大鼠胃殘留量較少。②肉眼及光鏡檢查無明顯潮紅、腫脹、糜爛、潰瘍等器質(zhì)性病變。③各組大鼠胃排空

4、率的比較:與正常組比較，模型組大鼠胃排空率降低(P＜0.05）;與模型組比較，枳實(shí)低、中、高劑量組及多潘立酮組大鼠胃排空率均升高（均P＜0.05）;與枳實(shí)低劑量組比較，枳實(shí)中、高劑量組及多潘立酮組大鼠胃排空率均升高（均P＜0.05）;與枳實(shí)中劑量組比較，多潘立酮組、枳實(shí)高劑量組大鼠胃排空率均升高(均P＜0.05)。④各組大鼠胃竇ICCs超微結(jié)構(gòu):正常組大鼠胃竇ICCs數(shù)量較多，體積較大;模型組ICCs數(shù)量減少，體積變小，細(xì)胞器減少或變性

5、，線粒體腫脹甚至空泡化，與周圍細(xì)胞和神經(jīng)纖維末梢之間的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)存在不同程度的紊亂及破壞;枳實(shí)低、中、高劑量組及多潘立酮組大鼠上述表現(xiàn)較模型組均有不同程度的改善。⑤各組大鼠腹主動(dòng)脈血清SCF含量的比較:與正常組比較，模型組大鼠腹主動(dòng)脈血清SCF含量顯著減少(P＜0.01);與模型組比較，枳實(shí)低劑量組大鼠腹主動(dòng)脈血清SCF含量升高（P＜0.05），枳實(shí)中、高劑量組及多潘立酮組大鼠腹主動(dòng)脈血清SCF含量均顯著升高(均P＜0.01);與多潘立酮

6、組比較，枳實(shí)高劑量組大鼠腹主動(dòng)脈血清SCF含量升高P＜0.05);與枳實(shí)低劑量組比較，枳實(shí)中劑量組、多潘立酮組大鼠腹主動(dòng)脈血清SCF含量均升高(均P＜0.05)，枳實(shí)高劑量組大鼠腹主動(dòng)脈血清SCF含量顯著升高(P＜0.01);與枳實(shí)中劑量組比較，枳實(shí)高劑量組大鼠腹主動(dòng)脈血清SCF含量升高(P＜0.05）。⑥免疫熒光法檢測各組大鼠胃竇組織c-Kit、SCF的表達(dá):與正常組比較，模型組大鼠胃竇組織c-Kit、SCF熒光強(qiáng)度均顯著減弱(均P＜

7、0.01)。與模型組比較，枳實(shí)低劑量組大鼠胃竇組織c-Kit、SCF熒光強(qiáng)度均增強(qiáng)(均P＜0.05)，枳實(shí)中、高劑量組及多潘立酮組大鼠胃竇組織c-Kit、SCF熒光強(qiáng)度均顯著增強(qiáng)(均P＜0.01)。與多潘立酮組比較，枳實(shí)高劑量組大鼠胃竇組織SCF熒光強(qiáng)度增強(qiáng)(P＜0.05)。與枳實(shí)低劑量組比較，枳實(shí)中劑量組、多潘立酮組大鼠胃竇組織c-Kit、SCF熒光強(qiáng)度均增強(qiáng)(均P＜0.05)，枳實(shí)高劑量組大鼠胃竇組織c-Kit、SCF熒光強(qiáng)度均顯著

8、增強(qiáng)（均P＜0.01）。與枳實(shí)中劑量組比較，枳實(shí)高劑量組大鼠胃竇組織SCF熒光強(qiáng)度增強(qiáng)（P＜0.05）。⑦RT-PCR法檢測各組大鼠胃竇組織c-Kit mRNA、SCFmRNA的表達(dá):與正常組比較，模型組大鼠胃竇組織c-Kit mRNA、SCFmRNA表達(dá)均顯著下降(均P＜0.01)。與模型組比較，枳實(shí)低劑量組大鼠胃竇組織c-Kit mRNA、SCF mRNA及多潘立酮組SCF mRNA表達(dá)均升高(均P＜0.05)，枳實(shí)中、高劑量組大鼠

9、胃竇組織c-Kit mRNA、SCF mRNA及多潘立酮組大鼠胃竇組織c-Kit mRNA表達(dá)均顯著升高(均P＜0.01)。與多潘立酮組比較，枳實(shí)中劑量組大鼠胃竇組織SCF mRNA表達(dá)升高(P＜0.05），枳實(shí)高劑量組大鼠胃竇組織c-Kit mRNA、SCF mRNA表達(dá)均顯著升高(均P＜0.01)。與枳實(shí)低劑量組比較，枳實(shí)中劑量組大鼠胃竇組織c-Kit mRNA、SCF mRNA及多潘立酮組大鼠胃竇組織c-Kit mRNA均升高(均

10、P＜0.05)，枳實(shí)高劑量組大鼠胃竇組織c-Kit mRNA、SCF mRNA表達(dá)均顯著升高(均P＜0.01)。與枳實(shí)中劑量組比較，枳實(shí)高劑量組大鼠胃竇組織SCFmRNA表達(dá)升高（P＜0.05），枳實(shí)高劑量組大鼠胃竇組織c-Kit mRNA表達(dá)顯著升高(P＜0.01)。⑧Western Blot法檢測大鼠胃竇組織c-Kit、 SCF蛋白的表達(dá):與正常組比較，模型組大鼠胃竇組織c-Kit、SCF蛋白表達(dá)均顯著下降(均P＜0.01)。與模型

11、組比較，枳實(shí)低劑量組大鼠胃竇組織c-Kit、SCF蛋白均升高(均P＜0.05)，枳實(shí)中、高劑量組及多潘立酮組大鼠胃竇組織c-Kit、 SCF蛋白表達(dá)均顯著升高（均P＜0.01）。與多潘立酮組比較，枳實(shí)中劑量組大鼠胃竇組織c-Kit蛋白及枳實(shí)高劑量組大鼠胃竇組織c-Kit、SCF蛋白表達(dá)均升高(均P＜0.05)。與枳實(shí)低劑量組比較，多潘立酮組大鼠胃竇組織c-Kit、SCF蛋白及枳實(shí)中劑量組SCF蛋白均升高(均P＜0.05)，枳實(shí)中劑量組c