野生夏葡萄ERF基因的分離克隆、序列分析及轉(zhuǎn)基因植株的篩選.pdf

1、干早、高鹽和低溫等非生物環(huán)境以及生物脅迫嚴(yán)重影響了植物的生長發(fā)育和限制作物的產(chǎn)量。在逆境脅迫條件下，植物首先要通過多種途徑感應(yīng)環(huán)境的變化，然后將環(huán)境變化轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞內(nèi)部的信號，在接受了細(xì)胞的內(nèi)部信號后，轉(zhuǎn)錄因子等反式作用因子與順式作用元件結(jié)合來啟動抗逆基因的表達(dá)，從而提高植物的抗逆性。許多植物逆境脅迫誘導(dǎo)基因的表達(dá)都在轉(zhuǎn)錄水平上受到轉(zhuǎn)錄因子和順式作用成分的調(diào)控，因此轉(zhuǎn)錄因子在植物抗逆信號傳遞過程中起著中心調(diào)節(jié)的作用。 文采用電子拼

2、接結(jié)合的RT-PCR，獲得了野生夏葡萄的另外一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子，分別命名為VaERF4-1；序列分析表明，VaERF4-1、VaERF4-2兩個(gè)基因大小分別為825bp、837bp，分別編碼由274個(gè)、278個(gè)氨基酸組成的分別含有一個(gè)AP2結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)。另外，通過GENBANK獲得兩個(gè)基因的啟動子區(qū)域的順式作用成分，發(fā)現(xiàn)在基因的啟動子區(qū)含有許多與生物和非生物脅迫有關(guān)的順式作用成分。通過同源性分析表明，VaERF4-1、VaERF4-2兩個(gè)基